Αφηρημένο

Ιστορικό

5α-αναγωγάσης 1 (5αR1) και 5α-αναγωγάσης 2 (5αR2) τη μετατροπή της τεστοστερόνης σε πιο ισχυρό ανδρόγυνο διυδροτεστοστερόνη. 5αR2 είναι το κύριο ισοένζυμο σε φυσιολογικό ιστό του προστάτη? Ωστόσο, οι περισσότεροι όγκοι του προστάτη έχει αυξηθεί 5αR1 και μειωμένη έκφραση 5αR2. Προηγουμένως, η φιναστερίδη (5αR2 αναστολέα) θεραπεία αρχίσει 3 εβδομάδες μετά την εμφύτευση του όγκου δεν είχε καμία επίδραση στην ανάπτυξη του όγκου του προστάτη αρουραίου Dunning R3327-H. Πιστεύουμε ότι ο όγκος αποζημιωθούν για θεραπεία finasteride με την αύξηση του όγκου της έκφρασης 5αR1 ή δραστηριότητα. Υποθέτουμε ότι η φιναστερίδη θεραπεία δεν θα μεταβάλλει σημαντικά την ανάπτυξη του όγκου, ακόμη και αν αρχίσει πριν από την εμφύτευση του όγκου, ενώ Dutasteride (αναστολέας 5αR1 και 5αR2) θεραπεία θα μειώσει την ανάπτυξη του όγκου, ανεξάρτητα από το εάν η θεραπεία ξεκίνησε πριν ή μετά την εμφύτευση του όγκου.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

Εξήντα οκτώ εβδομάδων αρσενικά γυμνά ποντίκια τυχαιοποιήθηκαν σε έλεγχο, πριν και μετά-Finasteride, και πριν και μετά-Dutasteride (83,3 mg φαρμάκου kg τροφής /) ομάδες δίαιτα. Προ- και μετα-ομάδες άρχισαν δίαιτες θεραπείας τους 1-2 εβδομάδες πριν ή 3 εβδομάδες μετά την υποδόρια ένεση του 1 × 10

5 WPE1-NA22 ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα προστάτη, αντίστοιχα. Οι όγκοι αφέθηκαν να αναπτυχθούν 22 εβδομάδες? περιοχές του όγκου, σωματικό βάρος, και την πρόσληψη τροφής μετρήθηκαν σε εβδομαδιαία βάση. Στο συμπέρασμα, του προστάτη και των σπερματοδόχων κυστιδίων βάρη μελέτης μειώθηκαν σημαντικά σε όλες τις ομάδες θεραπείας έναντι του ελέγχου? Dutasteride πρόσληψη μειώθηκε σημαντικά σπερματοδόχων βάρη κύστης σε σύγκριση με το finasteride πρόσληψη. Δεν παρατηρήθηκαν διαφορές μετρήθηκαν σε τελικό περιοχές όγκων ή βάρη των όγκων μεταξύ των ομάδων, πιθανόν να οφείλεται σε κακή ανάπτυξη του όγκου. Σε μελέτες παρακολούθησης, πολλαπλασιασμό WPE1-NA22 κυττάρων καρκίνου του προστάτη και της μητρικής γραμμής RWPE-1 επιθηλιακά κύτταρα του προστάτη δεν μεταβάλλονται με κατεργασία με τεστοστερόνη, διϋδροτεστοστερόνη, ή μιβολερόνη, υποδηλώνοντας ότι αυτές οι κυτταρικές σειρές δεν είναι ευαίσθητο σε ανδρογόνο.

Συμπέρασμα

Η έλλειψη αντίδρασης της WPE1-NA22 καρκινικά κύτταρα του προστάτη σε ανδρογόνα θεραπεία μπορεί να εξηγήσει την ανεπαρκή ανάπτυξη του όγκου παρατηρήθηκε. Πρόσθετες μελέτες για να καθοριστεί αν η φιναστερίδη και dutasteride είναι αποτελεσματικά στη μείωση του καρκίνου του προστάτη ανάπτυξη /μεγέθυνση

Παράθεση:. Opoku-Acheampong AB, Nelsen ΜΚ, Unis D, Lindshield BL (2012) Η Επίδραση του Finasteride και Dutasteride για την ανάπτυξη της WPE1-NA22 του καρκίνου του προστάτη ξενομοσχεύματα σε γυμνά ποντίκια. PLoS ONE 7 (1): e29068. doi: 10.1371 /journal.pone.0029068

Συντάκτης: Μινγκ Tat Λινγκ, Queensland University of Technology, Αυστραλία

Ελήφθη: 22 Αύγ του 2011? Αποδεκτές: 20 του Νοέμβρη 2011? Δημοσιεύθηκε: 5 Ιαν 2012

Copyright: © 2012 Opoku-Acheampong et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Το έργο περιγράφεται υποστηρίχθηκε από το Εθνικό Ινστιτούτο Υγείας (NIH) Αριθμός Grant P20 RR017686, τη θεσμική ανάπτυξη Βραβείο Πρόγραμμα του Εθνικού Κέντρου Έρευνας Πόρων, και από την Johnson Κέντρο για τη Βασική Έρευνα του Καρκίνου στο Πολιτειακό Πανεπιστήμιο του Κάνσας (http: //cancer.ksu .edu /). Το περιεχόμενό του είναι αποκλειστική ευθύνη των συγγραφέων και δεν αντιπροσωπεύουν απαραίτητα τις επίσημες απόψεις του Κέντρου Βιοϊατρικής Έρευνας Αριστείας για τα επιθηλιακά Λειτουργία στην υγεία και την ασθένεια ή ΝΙΗ. Αυτό δεν είναι συμβολή. 12-033-J από το σταθμό Πείραμα Κάνσας Αγροτική. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος του προστάτη είναι η πιο συχνά διαγιγνώσκεται κακοήθεια στους άνδρες, εκτιμάται ότι αντιπροσωπεύουν σχεδόν το 30% των περιπτώσεων καρκίνου το 2011 [1]. ανάπτυξη του όγκου του προστάτη συνήθως διεγείρεται από ανδρογόνα. Η τεστοστερόνη, το κύριο ανδρογόνο που κυκλοφορεί, μετατρέπεται από τα ισοένζυμα 5α-ρεδουκτάσης 1 και 5α-ρεδουκτάσης 2 στο πιο ισχυρό διυδροτεστοστερόνη, η οποία συνδέεται με έως και δέκα φορές υψηλότερη συγγένεια προς τον υποδοχέα ανδρογόνων από την τεστοστερόνη [2], [3] . 5α-ρεδουκτάσης 1 είναι η κύρια ισοένζυμο στο ανθρώπινο ήπαρ και nongenital δέρμα, ενώ 5α-ρεδουκτάσης 2 είναι το κύριο ισοένζυμο στον προστάτη, επιδιδυμίδα, σπερματικό κυστίδιο, και των γεννητικών οργάνων του δέρματος [4].

Ανασταλτική παραγωγή ανδρογόνων και ή /και το κλείδωμα της δράσης είναι κοινές προσεγγίσεις για την καταπολέμηση του καρκίνου του προστάτη [5]. Οι περισσότερες μελέτες έκθεση αυξήθηκε 5α-ρεδουκτάσης 1 και μειωμένη 5α-αναγωγάσης έκφραση 2 mRNA ή δραστικότητα στον καρκίνο του προστάτη [6] – [9]. Άλλοι έχουν αναφέρει αυξημένη 5α-ρεδουκτάσης 1 mRNA έκφραση και σημαντικές αλλαγές στην 5α-αναγωγάσης έκφραση 2 mRNA στον καρκίνο του προστάτη έναντι φυσιολογικού ιστού [10], η αυξημένη έκφραση αμφότερων των ισοενζύμων στον καρκίνο του προστάτη [5], ή απώλεια της έκφρασης και των δύο ισοενζύμων σε μεταστατικό καρκίνο του προστάτη [11]. Δύο αναστολείς της 5α-αναγωγάσης, η φιναστερίδη (5α-αναγωγάσης 2 αναστολέα) και Dutasteride (5α-ρεδουκτάσης 1 και 2 αναστολέα), χρησιμοποιούνται συνήθως για τη θεραπεία της καλοήθους υπερπλασίας του προστάτη (ΚΥΠ) [12]. Αυτοί οι αναστολείς 5α-αναγωγάσης θα μπορούσαν επίσης να χρησιμοποιηθούν για την πρόληψη ή τη θεραπεία του καρκίνου του προστάτη με τη μείωση των επιπέδων διϋδροτεστοστερόνης [13].

Προς υποστήριξη αυτής της δυνατότητας, η φιναστερίδη μειωμένη επικράτηση του καρκίνου του προστάτη κατά 24,8% σε πρόληψη του καρκίνου Trial προστάτη ( PCPT) [14]. Ομοίως, στην Μείωση κατά Dutasteride του προστάτη Εκδηλώσεις (ΜΕΙΩΣΗ) δίκη, dutasteride μειωμένη συχνότητα εμφάνισης καρκίνου του προστάτη κατά 23% [15]? Ωστόσο, με βάση τα αποτελέσματα από αυτές τις μελέτες, η Υπηρεσία Τροφίμων και Φαρμάκων (FDA) αναθεώρησε πρόσφατα τις πληροφορίες ασφαλείας για τα δύο φάρμακα να δηλώσει ότι τα φάρμακα αυξάνουν τον κίνδυνο των ασθενών για την ανάπτυξη υψηλής ποιότητας καρκίνο του προστάτη [16]. Σε ζωικά μοντέλα, dutasteride, αλλά όχι η φιναστερίδη, ανέστειλαν την ανάπτυξη του Dunning R-3327H όγκους του προστάτη αρουραίου [17]. Σε γυμνούς ποντικούς που φέρουν LNCaP ανθρώπινου προστάτη ξενομοσχεύματα καρκίνου, τόσο finasteride και dutasteride μειωμένη ανάπτυξη του όγκου, αν και dutasteride ήταν πιο αποτελεσματική σε μια ισογραμμομοριακή δόση [17]. Σε αρουραίους, η φιναστερίδη μειώθηκαν σημαντικά τα βάρη ιστού ευαίσθητο σε ανδρογόνο, αλλά δεν μειώνουν την ανάπτυξη του όγκου Dunning R-3327H [18]

Σε αυτές τις μελέτες σε ζώα, η φιναστερίδη και dutasteride χορήγηση άρχισε μετά καθορίστηκαν όγκων.? διοίκηση φιναστερίδη που ξεκίνησε πριν από την εμφύτευση του όγκου μπορεί να είναι πιο αποτελεσματική. Από την άλλη πλευρά, ανεξάρτητα από το πότε ξεκινά η φιναστερίδη θεραπεία, κύτταρα καρκίνου του προστάτη μπορεί να αντισταθμίσει 5α-ρεδουκτάσης 2 η αναστολή αυξάνοντας 5α-ρεδουκτάσης 1 έκφραση και /ή δραστικότητα? Έτσι, η διπλή ανασταλτική δράση των dutasteride μπορεί να προσφέρει ένα πλεονέκτημα έναντι finasteride. Εξετάσαμε το αποτέλεσμα της finasteride και dutasteride δίαιτες άρχισε 1 εβδομάδα πριν ή 3 εβδομάδες μετά την υποδόρια ένεση WPE1-NA22 ανθρώπινα κύτταρα καρκίνου του προστάτη στα οπίσθια λαγόνια αρσενικών γυμνών ποντικών. Χρησιμοποιήσαμε WPE1-NA22 ξενομοσχεύματα καρκίνου του προστάτη επειδή αυτά τα ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα μπορούν να καλλιεργηθούν

in vitro

, ακόμη σχηματίζουν μη επεμβατική όγκων με ρυθμούς ανάπτυξης και την παθολογία παρόμοια με τον όγκο Dunning R-3327H [19], [20].

Υλικά και Μέθοδοι

Η Επιτροπή Θεσμικών ζωικά Φροντίδα και Χρήση (IACUC) του Πανεπιστημίου της Πολιτείας του Κάνσας ενέκρινε όλες τις διαδικασίες των ζώων (πρωτόκολλο 2794).

τηλέφωνα Γραμμές

WPE1-NA22 καρκίνου του προστάτη και RWPE-1 επιθηλιακών κυττάρων του προστάτη (ATCC, Manassas, VA) καλλιεργήθηκαν σε μέσα κερατινοκυττάρων άνευ ορού που περιέχει εκχύλισμα βόειας υπόφυσης και του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (GIBCO Invitrogen, Carlsband, CA). Για τη μελέτη των ζώων, τα κύτταρα WPE1-NA22 καλλιεργήθηκαν σε 75 cm

2 φιάλες (Fisher Scientific, Pittsburg, ΡΑ), απομακρύνθηκε με θρυψίνη (Sigma-Aldrich, St. Louis, ΜΟ), και φυγοκεντρήθηκε για 7 λεπτά στους 130 χ g στους 37 ° C. Το υπερκείμενο απομακρύνθηκε και τα κύτταρα ανασυστάθηκαν σε Matrigel ™ (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ) σε συγκέντρωση 5.000 κύτταρα /μL. Είκοσι μικρολίτρα Matrigel ™ που περιέχει ~ 1 × 10

5 WPE1-NA22 καρκινικά κύτταρα εγχύθηκαν εντός εκάστου οπίσθια πλευρά γυμνών ποντικών χρησιμοποιώντας μία θήκη σύριγγας Hamilton (Hamilton, Reno, NV) εφοδιασμένη με σύριγγα του 1 mL και 25 gauge 5/8-in. βελόνα (και τα δύο από την BD Biosciences).

Ζώα, Μελέτη δίαιτες και Σχεδιασμός

Δύο ομάδες των 30 (60 συνολικά) 8-εβδομάδων αρσενικών άτριχων ποντικών (Charles Rivers, Wilmington, ΜΑ) στεγάστηκαν ξεχωριστά σε στείρες συνθήκες. Οι ποντικοί παρακολουθούνται καθημερινά, ζυγίζονται σε εβδομαδιαία βάση, και υπό τον όρο διατροφή και το νερό

κατά βούληση

. AIN93-G θεραπεία δίαιτες (Έρευνα Δίαιτες, New Brunswick, NJ) που περιέχονται Dutasteride (παρέχεται από την εταιρεία GlaxoSmithKline Pharmaceuticals, Research Triangle Park, NC) και φιναστερίδη (Kemprotec, Μίντλεσμπρο, UK) σε 83.3 mg /kg δίαιτας, έχουν σχεδιαστεί για να παρέχει ~ 10 mg φαρμάκου /kg σωματικού βάρους, η οποία ήταν η μεσαία δόση dutasteride χρησιμοποιούνται από Xu και οι συνεργάτες του [17]. Μετά την παραλαβή, οι ποντικοί εγκλιματίστηκαν για 1 εβδομάδα πριν τυχαιοποιήθηκαν σε έλεγχο, Pre-Finasteride, μετα-Finasteride, Pre-Dutasteride, και Μετα-Dutasteride ομάδες (η = 10-12, Εικόνα 1). Πέντε ποντίκια δεν κατάφερε να ολοκληρώσει τη μελέτη για λόγους υγείας που δεν σχετίζονται με την ανάπτυξη του όγκου. Προ- και μετα-ομάδες άρχισαν δίαιτες θεραπεία τους 1-2 εβδομάδες πριν ή 3 εβδομάδες μετά την ένεση των κυττάρων WPE1-NA22, αντίστοιχα. Το χρονικό σημείο της ένεσης τρεις εβδομάδες μετά επιλέχθηκε επειδή Canene-Adams και οι συνεργάτες ξεκίνησαν finasteride θεραπεία στο ίδιο σημείο [18]. Η μελέτη τερματίστηκε 22 εβδομάδες μετά την εμφύτευση του όγκου. Τα ποντίκια υποβλήθηκαν σε ευθανασία με CO

2 εισπνοή και το αίμα αμέσως συντάχθηκε μέσω καρδιακής παρακέντησης και φυγοκεντρήθηκε για 1 λεπτό στα 2000 × g για να ληφθεί ορός. Οι ιστοί αποκόπηκαν, flash κατεψυγμένα σε υγρό άζωτο, και να αποθηκεύονται σε καταψύκτη στους -80 ° C.

Προ- και μετα-ομάδες άρχισαν δίαιτες θεραπεία τους 1-2 εβδομάδες πριν ή 3 εβδομάδες μετά WPE1-NA22 κυττάρων ένεση, αντίστοιχα. Η μελέτη τερματίστηκε 22 εβδομάδες μετά την εμφύτευση του όγκου

Η

περιοχή του όγκου υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας τον τύπο για την περιοχή της μιας έλλειψης:. Περιοχή = π * (μήκος /2) * (πλάτος /2). Η μέση περιοχή του όγκου σε μια ομάδα ήταν υπολογίζονται αθροίζοντας τα μεμονωμένες περιοχές του όγκου για την ομάδα, τότε διαιρώντας με το συνολικό αριθμό των τοποθεσιών όγκου στην ομάδα. Μηδενικά καταγράφηκαν για τις περιοχές του όγκου, χωρίς μετρήσιμα όγκους.

In Vitro

ανδρογόνων Θεραπεία και Κυτταρικής Βιωσιμότητας

κυττάρων

WPE1-NA22 (αριθμός πέρασμα ≤7) και RWPE-1 κύτταρα (αριθμός ανακαλλιέργειας ≤6) απλώθηκαν σε 10000 κύτταρα ανά φρεάτιο σε πλάκες 96 φρεατίων (Fisher Scientific, Pittsburg, ΡΑ). Εικοσιτέσσερις ώρες μετά την επίστρωση, και οι δύο κυτταρικές σειρές υποβλήθηκαν σε θεραπεία με τεστοστερόνη (0,1 ηΜ-30 ηΜ), διυδροτεστοστερόνη (0,03 ηΜ-100 ηΜ, και οι δύο από την Sigma Aldrich, St. Louis, ΜΟ), και συνθετικά μιβολερόνη ανδρογόνων (0,01 ηΜ- 20 ηΜ, PerkinElmer, Waltham, ΜΑ) σε 0.1% αιθανόλη. Media και θεραπείες ανδρογόνων παρασκευάζονται καθημερινά και αλλάζουν κάθε 24 ώρες κατά τη διάρκεια της περιόδου θεραπείας 5 ημερών. Η βιωσιμότητα των κυττάρων ποσοστώθηκε χρησιμοποιώντας το υδατικό διάλυμα της δοκιμασίας CellTiter 96 Ένα (Promega Corporation, Madison, WI) με αναγνώστη πλάκας Bio-Tek uQuant (BioTek, Winooski, VT). Τα αποτελέσματα που παρουσιάζονται είναι από 4 επαναλήψεις των πειραμάτων

Στατιστική Ανάλυση

Τα δεδομένα αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας SAS 9.2 (SAS Institute Inc., Cary, Βόρεια Καρολίνα), με p & lt?. 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική. ANCOVA με κοόρτη ως συμμεταβλητή χρησιμοποιήθηκε για να αναλυθούν αρχικά τα αποτελέσματα της μελέτης των ζώων. Η συμμεταβλητή αφαιρέθηκε επειδή δεν αντιπροσωπεύουν ένα σημαντικό ποσό της διακύμανσης σε όλες τις αναλύσεις, και ANOVA με δοκιμή Tukey χρησιμοποιήθηκε σε συγκεντρωτικά δεδομένα από τις δύο ομάδες. Φυσικό κούτσουρα χρησιμοποιήθηκαν για τη μετατροπή των δεδομένων όταν τα δεδομένα δεν πληρούν μοντέλο παραδοχές. Kruskal Wallis μη παραμετρική μονόδρομη ANOVA χρησιμοποιήθηκε για εμφάνιση όγκου. δεδομένα βιωσιμότητας κυττάρων ανδρογόνων θεραπείας αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας ANOVA με τεστ Dunnett

Αποτελέσματα

Τελικό σωματικό βάρος του προ-Finasteride ομάδας ήταν σημαντικά υψηλότερο από τον έλεγχο (Πίνακας 1, σελ & lt? 0,05). παρά καμία διαφορά στην καθημερινή πρόσληψη τροφής ή την αποδοτικότητα τροφής (τα δεδομένα δεν δείχνονται) μεταξύ των ομάδων. Tumor επίπτωση ήταν υψηλή, 86,4% έως 95,5%, χωρίς διαφορά μεταξύ των ομάδων (Σχήμα 2). Καμία διαφορά δεν βρέθηκε σε βάρη των όγκων και των περιοχών όγκου μεταξύ των ομάδων (Πίνακας 1 και Σχήμα 3), πιθανό λόγω της κακής ανάπτυξης του όγκου. Το μεγαλύτερο μέση διάμετρος όγκου σε κάθε ομάδα ήταν 4,33 mm. Παρά δεν μεταβάλλουν την ανάπτυξη του όγκου, τόσο finasteride και dutasteride μειώθηκαν σημαντικά προστάτη και των σπερματοδόχων κυστιδίων βάρη, ως ποσοστό του σωματικού βάρους (ρ & lt? 0,05). Επιπλέον, υπήρξε μια σημαντική μείωση στο σπερματικό κυστίδιο βάρη σε ομάδες dutasteride έναντι finasteride ομάδες (Πίνακας 1)

Μηδενικά καταγράφηκαν για καρκινικές θέσεις χωρίς έναν όγκο.? Δεν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων

Η

Μηδενικά καταγράφηκαν για τις περιοχές του όγκου χωρίς όγκους.? Δεν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων.

Η

Αυτές οι μειώσεις των ανδρογόνων-ευαίσθητους ιστούς δείχνουν ότι η φιναστερίδη και dutasteride είχαν ασκώντας αντι-ανδρογόνο δράση τους. Μια εξήγηση για την κακή ανάπτυξη είναι ότι τα κύτταρα WPE1-NA22 δεν είναι ανδρογόνο-ευαίσθητα όπως και η μητρική RWPE-1 ανθρώπινου προστάτη επιθηλιακά κύτταρα τους [21]. Έτσι, WPE1-NA22 και τα κύτταρα RWPE-1 υποβλήθηκαν σε αγωγή με διάφορες συγκεντρώσεις τεστοστερόνης, διυδροτεστοστερόνη, και το συνθετικό μιβολερόνη ανδρογόνων. Εμείς δεν βρήκε καμία διαφορά στον αριθμό των κυττάρων είτε σε κυτταρική γραμμή, όταν αντιμετωπίζονται με διάφορες συγκεντρώσεις των ανδρογόνων (σχήματα 4 και 5).

Η

Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη, εξετάσαμε οι επιδράσεις των δύο αναστολέων 5α-αναγωγάσης, φιναστερίδη και dutasteride, πριν και μετά την εμφύτευση του όγκου επί της ανάπτυξης WPE1-NA22 ξενομοσχεύματα σε γυμνά ποντίκια. Tumor επίπτωση ήταν υψηλή για όλες τις ομάδες που κυμαίνονται από 86,4% έως 95,5%, παρόμοια με την ~92-99% αναφερθεί σε προηγούμενες μελέτες για τον καρκίνο του προστάτη αρουραίου Dunning R-3327H [18], [22]. Η κακή ανάπτυξη των WPE1-NA22 ξενομοσχεύματα σε γυμνά ποντίκια ήταν μια έκπληξη, δεδομένου ότι ο όγκος ξενομόσχευμα όγκου στο παρελθόν ήταν φέρεται να είναι 0,2 εκατοστά

3 7 εβδομάδες μετά την εμφύτευση [20]. Back-υπολογισμό αυτό είναι μια διάμετρο όγκου των ~7.26 mm, το οποίο είναι πολύ μεγαλύτερο από ό, τι παρατηρείται σε οποιαδήποτε στιγμή κατά τη διάρκεια της μελέτης μας.

Μια μεθοδολογική διαφορά μεταξύ των μελετών που ενδέχεται να συνέβαλαν με τις διαφορές στην ανάπτυξη του όγκου είναι η διαφορά του αριθμού των WPE1-NA22 καρκινικά κύτταρα εγχέονται στα πλευρά των ποντικών. Webber και οι συνεργάτες υποδόρια ένεση 5 × 10

5 κύτταρα WPE1-NA22, πέντε φορές περισσότερα κύτταρα από ό, τι με ένεση σε αυτή τη μελέτη [20]. Λιγότερα κύτταρα εγχύθηκαν λόγω των ανησυχιών ότι η αύξηση του όγκου θα είναι πολύ γρήγορη, με δεδομένο το μέγεθος αναφερθεί σε 7 εβδομάδες σε σύγκριση με Dunning R-3327H όγκους που δεν είναι ψηλαφητή μέχρι 9-10 εβδομάδες μετά την εμφύτευση του όγκου [18], [22] . Δύο άλλες πιθανές εξηγήσεις για την κακή ανάπτυξη του WPE1-NA22 ξενομοσχευμάτων είναι ότι οι γυμνοί ποντικοί δημιουργία ανοσοαπόκρισης εναντίον των καρκινικών κυττάρων ή ότι τα κύτταρα δεν ήταν ευαίσθητο σε ανδρογόνο, έτσι ανδρογόνα δεν διέγειρε την ανάπτυξή τους.

Ξεκινήσαμε να ερευνήσει την τελευταία δυνατότητα με κατεργασία κυττάρων WPE1-NA22 και της μητρικής κυτταρικής γραμμής τους, RWPE-1 ανθρώπινου προστάτη επιθηλιακά κύτταρα με μια ποικιλία από συγκεντρώσεις τριών ανδρογόνα. Προηγουμένως, η ανάπτυξη των κυττάρων RWPE-1 αυξήθηκε με έναν δοσο-εξαρτώμενο τρόπο όταν υποβάλλονται σε επεξεργασία με μιβολερόνη σε δόσεις 0,01-10 ηΜ [21]. Οι συγκεντρώσεις ανδρογόνων που χρησιμοποιούνται σε μας

in vitro

μελέτες βασίστηκαν σε διάφορες μελέτες που εξέτασαν την πολλαπλασιαστική απάντηση στα τρία ανδρογόνα [21], [23] – [25]. Φυσιολογικές ενδοπροστατική επίπεδα τόσο της τεστοστερόνης (~ 0,2 ηΜ-0,7 ηΜ) [26] και διυδροτεστοστερόνη (5 ηΜ-18 ηΜ) [17], [27], [28] σε ανθρώπους εμπίπτει εντός της περιοχής των συγκεντρώσεων που χρησιμοποιούνται. Για μιβολερόνης, χρησιμοποιήσαμε τις συγκεντρώσεις από Bello και οι συνεργάτες του [21], αλλά διπλασιάστηκε επίσης κορυφαία συγκέντρωσή τους για την υψηλότερη συγκέντρωση μας.

Είναι ενδιαφέρον, βρήκαμε καμία διαφορά στον αριθμό των κυττάρων είτε σε κυτταρική σειρά σε ανταπόκριση διαφόρων Οι συγκεντρώσεις των αντίστοιχων θεραπειών ανδρογόνων. Προσπαθήσαμε να επαναλάβετε τη μεθοδολογία των Bello και τους συναδέλφους? με τη μόνη διαφορά ότι χρησιμοποιήσαμε τη δοκιμασία MTS ενώ χρησιμοποίησαν ένα μπλε του μεθυλενίου δοκιμασία για την ποσοτικοποίηση βιωσιμότητας κυττάρων [21].

Η έλλειψη ανδρογόνων ευαισθησίας και των δύο κυττάρων μπορεί να εξηγήσει την παρατηρούμενη κακή ανάπτυξη του όγκου. Υποστηρίζοντας περαιτέρω τα ευρήματά μας είναι ότι υποδοχέα πυρηνικής ανδρογόνων, τα πυρηνικά 5α-αναγωγάσης 2, και του κυτταροπλάσματος τα επίπεδα της πρωτεΐνης 5α-αναγωγάσης 1 είναι μη ανιχνεύσιμα σε RWPE-1 κύτταρα [29]. Οι κυτταρικές σειρές που προέρχονται από αυτή την μητρική γραμμή πιθανό να έχουν παρόμοια επίπεδα αυτών των βασικών ανδρογόνων πρωτεϊνών του μεταβολισμού /δράση. Επιπλέον, και οι δύο κυτταρικές σειρές αναπτύχθηκαν σε μέσο χωρίς ορό εμβρύου μόσχου και εξωγενείς ανδρογόνα, που σημαίνει ότι είναι ανδρογόνο-free. Στο σύνολό τους, τα αποτελέσματα αυτά πρέπει να εξετάζονται πριν τη χρήση ή την ερμηνεία των αποτελεσμάτων από τις καρκινογόνες κυτταρικές σειρές που προέρχονται της RWPE-1 και.

Ένα άλλο εκπληκτικό αποτέλεσμα ήταν η σημαντικά υψηλότερη του σωματικού βάρους στο Pre-Finasteride ομάδα χωρίς μεταβολή στα τρόφιμα πρόσληψη ή την αποτελεσματικότητα των τροφίμων. Με βάση την τάση της αύξησης στην ομάδα Pre-Finasteride, πιστεύουμε ότι η ομάδα ήταν βαρύτερο κατά την τυχαιοποίηση, ακόμη και αν οι διαφορές στο σωματικό βάρος δεν ήταν σημαντικές κατά τη χρονική στιγμή. Το Pre-Finasteride ομάδα ήταν ήδη σημαντικά βαρύτερο από το Pre-Dutasteride ομάδα 1 εβδομάδα μετά την τυχαιοποίηση παρά αμελητέες διαφορές στην πρόσληψη τροφής (το Pre-Dutasteride ομάδα καταναλώνεται αριθμητικά περισσότερο κατά τη διάρκεια αυτής της εβδομάδας), η οποία υποστηρίζει την πίστη μας. Finasteride έχει βρεθεί ότι αυξάνει ελαφρώς αύξηση του σωματικού βάρους σε άνδρες με καρκίνο του προστάτη [30], αλλά η μακροπρόθεσμη πρόσληψη δεν αύξησε τα βάρη του σώματος των αρουραίων [31]. Δίαιτες σε όλες τις ομάδες θεραπείας ήταν καλά ανεκτή χωρίς σημειωθεί δυσμενή αποτελέσματα.

Το μέγεθος της μείωσης του προστάτη και των σπερματοδόχων κύστεων βάρη σε απόκριση σε Dutasteride και finasteride ήταν παρόμοιες με αυτές που αναφέρθηκαν προηγουμένως [18], [32], [33]. Βρήκαμε επίσης μια σημαντική μείωση στο σπερματικό κυστίδιο βάρη σε dutasteride ομάδες έναντι finasteride ομάδες. Για το καλύτερο της γνώσης μας, είμαστε οι πρώτοι που αναφέρουν ότι τα αποτελέσματα dutasteride σε μεγαλύτερο μέγεθος της μείωσης στο σπερματικό βάρη κυστίδια από φιναστερίδη. Οι ποντικοί στη μελέτη μας καταναλώνονται περίπου 13 mg /kg /ημέρα του finasteride ή dutasteride, η οποία είναι μεγαλύτερη από την 5 mg /kg /ημέρα του finasteride χρησιμοποιούνται από Canene και συνεργάτες [18], αλλά παρόμοιο με το μεσαία δόση dutasteride χρησιμοποιούνται από Xu και οι συνεργάτες του [17].

με λίγα λόγια, αν δεν είχαμε δει μια επίδραση και των δύο αναστολέων στην ανάπτυξη της WPE1-NA22 ξενομόσχευμα

in vivo

, τα αποτελέσματα από τον προστάτη και των σπερματοδόχων κύστεων δείχνουν ότι η αναστολείς ήταν αποτελεσματικές στην αναστολή του ενζύμου 5α αντίστοιχες-αναγωγάσης τους (s). Περαιτέρω έρευνα σε διάφορα μοντέλα θα πρέπει να απαντήσει η έρευνα μας ερώτημα? Ωστόσο, τα αποτελέσματά μας αμφισβητούν την ογκογονικότητα των κυττάρων WPE1-NA22 σε γυμνά ποντίκια και το ανδρογόνο-ευαισθησία WPE1-NA22 και τα κύτταρα RWPE-1.