Αφηρημένο

Η ουροκινάση υποδοχέα ενεργοποιητή πλασμινογόνου (uPAR) έχει προταθεί ως πιθανός προγνωστικός παράγοντας για την καρκίνου του παχέος εντέρου (CRC) επιβίωση των ασθενών. Ωστόσο, η έκφραση CRC uPAR παραμένει αμφιλεγόμενη, ιδίως όσον αφορά τους τύπους των κυττάρων, όπου uPAR υπερεκφράζεται (π.χ., επιθήλιο (uPAR

Ε) ή το στρώμα που σχετίζονται με κύτταρα (uPAR

S)) και των συναφών προγνωστική σημασία. Σε αυτή τη μελέτη, τα δύο uPAR αντι μονοκλωνικά αντισώματα επιτόπου-ειδικών (MAbs) θα μπορούσε διακρίσεις έκφραση του uPAR

E από uPAR

S και χρησιμοποιήθηκαν για να εξετάσουν αυτή την συσχέτιση με την επιβίωση των σταδίων Β και του καρκίνου του ορθού C (RC) ασθενείς. Χρησιμοποιώντας ανοσοϊστοχημεία, MAbs # 3937 και R4 χρησιμοποιήθηκαν για να κάνουν διακρίσεις uPAR

Ε από uPAR

S αντίστοιχα στις κεντρικές και επεμβατική περιοχές μετωπική 170 στάδιο Β και 179 δείγματα στάδιο C RC. αναλύσεις παλινδρόμησης Kaplan-Meier και Cox χρησιμοποιήθηκαν για τον προσδιορισμό σύνδεσης με την επιβίωση. έκφραση uPAR συνέβη και στις δύο επιθηλιακών και στρωματικών διαμερίσματα με διαφορική έκφραση παρατηρείται σε πολλές περιπτώσεις, υποδεικνύοντας uPAR

Ε και uPAR

S έχουν διαφορετικές κυτταρικές ρόλους. Στις κεντρικές και επεμβατική περιοχές μετωπική, uPAR

Ε συσχετίστηκε αρνητικά με τη συνολική επιβίωση στάδιο Β (HR = 1,9? P = 0,014 και HR = 1.5? P = 0,031, αντίστοιχα) αναπαράγει τα αποτελέσματα από προηγούμενες μελέτες. uPAR

S στο μεταναστευτικό μέτωπο συσχετίστηκε με μακρύτερη επιβίωση στάδιο C (HR = 0,6? p = 0,007), αντανακλώντας μελέτες που αποδεικνύουν ότι μακροφάγων peritumoural συσσώρευση συνδέεται με μεγαλύτερη επιβίωση. Αυτή η μελέτη καταδεικνύει ότι διαφορετικά επιτόπια υΡΑΚ θα πρέπει να θεωρηθεί ότι εκφράζονται σε διαφορετικούς τύπους κυττάρων κατά τη διάρκεια της εξέλιξης του όγκου και σε διαφορετικά στάδια της RC. Η κατανόηση του πώς uPAR

Ε και έκφραση uPAR

S επηρεάζει την επιβίωση αναμένεται να αποτελέσει ένα χρήσιμο κλινικό προγνωστικός δείκτης των σταδίων Β και Γ RC

Παράθεση:. Ahn SB, Chan C, Dent ΤΗΣ, Mohamedali Α, Kwun SY, Clarke C, et al. (2015) επιθηλιακών και στρωματικών κυττάρων πλασμινογόνου ουροκινάσης ενεργοποιητή υποδοχέα Έκφραση διαφορικά συσχετίζεται με επιβίωση σε καρκίνο του ορθού Στάδια Β και Γ Ασθενείς. PLoS ONE 10 (2): e0117786. doi: 10.1371 /journal.pone.0117786

Ακαδημαϊκό Επιμέλεια: Αντώνης W. Ι Lo, Queen Mary Hospital, ΧΟΝΓΚ ΚΟΝΓΚ

Ελήφθη: 15 του Σεπτέμβρη του 2014? Αποδεκτές: 31, Δεκεμβρίου 2014? Δημοσιεύθηκε: 18 του Φλεβάρη 2015

Copyright: © 2015 Ahn et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του χαρτιού

χρηματοδότηση: η μελέτη αυτή υποστηρίζεται με επιχορηγήσεις ερευνητικών έργων από το NHMRC (# 1010303), τον καρκίνο του Συμβουλίου ΝΝΟ (RG10-04 (Δ) παραδείγματα μερική έκφραση του uPAR

Ε και ισχυρή uPAR

S, αντίστοιχα. Αντιστρόφως, (ε) & amp? (Στ) δείχνουν ισχυρή uPAR

Ε και μερική uPAR

S, αντίστοιχα

Η

περινεοπλασματικής τονισμό του υΡΑΚ (δηλαδή, uPAR

PT?. Έκφραση του uPAR στα κύτταρα του στρώματος που σχετίζονται και συγκεντρώνονται γύρω από το επιθήλιο του όγκου) που αντιπροσωπεύεται στο (γ), χρωματίστηκαν με R4.

η

uPAR σε ιστούς RC ήταν εντόνως εκφρασμένο στο μεταναστευτικό μέτωπο όγκου σε σύγκριση με την κεντρική περιοχή για τις δύο τοποθεσίες επιθηλιακών και στρωματικών, συνεπής με άλλους τύπους καρκίνου [6,7]. Μια Wilcoxon ζεύγη υπέγραψε τάξεις δοκιμή έδειξε ότι η χρώση ένταση τόσο uPAR

Ε και uPAR

S ήταν σημαντικά υψηλότερη στην επεμβατική μπροστά σε σχέση με την κεντρική τοποθεσία του όγκου (uPAR

Ε, n = 255, p & lt? 0.001? uPAR

S, n = 257, p & lt?. 0.001)

ασθενής

παρακολούθηση

στο τέλος της μελέτης (Δεκέμβριος 2011), από τους 363 ασθενείς οι οποίοι είχαν ένα ενημερωτική αποτέλεσμα TMA /IHC για uPAR

Ε ή uPAR

S, 243 είχαν αποβιώσει, 111 είχαν ακολουθηθεί για μεταξύ 103 και 246 μηνών (μέση τιμή 171 μήνες) και 9 είχαν χαθεί κατά την παρακολούθηση μετά από ένα μέσο όρο 56 μήνες. Των ασθενών που απεβίωσαν, 117 πέθαναν από CRC, 117 από άλλες αιτίες και 9 από άγνωστες αιτίες.

uPAR

Ε και την επιβίωση σε όγκους σταδίου Β

Κεντρική περιοχή. Για τα στάδια Β και Γ συνδυάζονται, ισχυρότερη uPAR

χρώση Ε συσχετίστηκε με φτωχότερη επιβίωση (p = 0,004). Ωστόσο, όταν στρωματοποιημένη κατά το στάδιο αυτό, η σύνδεση συνεχίστηκε έντονα για τη φάση Β (p = 0,002), αλλά εξαφανίστηκε για το στάδιο Γ (p = 0,589). Αυτό δείχνει ότι η προγνωστική σημασία της uPAR

E περιορίστηκε στο στάδιο ασθενείς Β. Ως εκ τούτου, μόνο η σχέση μεταξύ uPAR

Ε και την επιβίωση των ασθενών σταδίου Β αναλύθηκε περαιτέρω. Όπως παρατηρήθηκε καμία σημαντική διαφορά επιβίωσης μεταξύ των αδύνατων και μέτρια κατηγορίες χρώση, αυτοί συνδυάστηκαν για να σχηματίσουν ένα ενιαίο «ενδιάμεση» κατηγορία. Επιβίωση ήταν σημαντικά φτωχότερη στην ενδιάμεση ομάδα από την αρνητική ομάδα (p = 0.035), αλλά όχι σημαντικά διαφορετική μεταξύ των ενδιάμεσων και των ισχυρών ομάδων (p = 0,206). Έτσι, η τελευταία συνδυάστηκαν σε ένα ενιαίο θετική uPAR

ομάδα Ε. Η ανάλυση Kaplan Meier έδειξε ότι οι ασθενείς στο uPAR

E θετική ομάδα παρουσίασαν σημαντικά φτωχότερη συνολική επιβίωση από αυτούς που το uPAR

E αρνητική ομάδα (Σχήμα 3α?. p = 0,006). Η πολυπαραγοντική ανάλυση έδειξε ότι uPAR

Ε στο κεντρικό όγκο ήταν μια ανεξάρτητη αρνητική προγνωστικός δείκτης της συνολικής επιβίωσης σε ασθενείς σταδίου Β RC μετά από προσαρμογή για άλλους προγνωστικούς μεταβλητές (HR 1,9 [95% CI 1.1 έως 3.1] Wald-p 0,014) ( Πίνακας 2)

σε ασθενείς σταδίου β, (α):. συνολική επιβίωση ήταν σημαντικά μειωμένη με uPAR

E θετικά στην κεντρική περιοχή του όγκου (n = 125) και (β): με ισχυρά uPAR

Ε σε επεμβατικές μπροστά από όγκους (n = 168). Σε ασθενείς σταδίου C, (γ): ισχυρή uPAR

S στην επεμβατική μπροστά του όγκου (n = 179) ήταν σημαντικά σχετίζεται με μεγαλύτερη συνολική επιβίωση. (Δ): Θετική uPAR

PT στην επεμβατική μπροστά του όγκου (n = 179) ήταν επίσης σημαντικά που συνδέονται με την μεγαλύτερη συνολική επιβίωση

Η

Επεμβατική μπροστά.. Για συνδυασμένη στάδια Β και C, δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ uPAR

Ε και συνολική επιβίωση (ρ = 0.179). Οι ασθενείς με όγκους σταδίου C δεν είχε καμία συσχέτιση (p = 0,848), αλλά το

σ

-τιμή πλησίασε σημασία στο στάδιο Β (p = 0,087). Σε περίπτωση που το τελευταίο αποτέλεσμα ήταν μια λειτουργία των μικρών αριθμών δείγματος σε ορισμένες κατηγορίες, τα δεδομένα επανεξεταστεί από το συνδυασμό αρνητικό, ασθενές και μέτρια χρώση, με την ένωσή τους με τη συνολική επιβίωση δεν διέφεραν σημαντικά (p = 0,294). Kaplan Meier ανάλυση του υΡΑΚ

έκφραση Ε στη συνδυασμένη ομάδα έδειξε ασθενείς με ισχυρή έκφραση του υΡΑΚ

E είχαν σημαντικά φτωχότερη επιβίωση (ρ = 0,017) (Σχ. 3β). Αυτό συνεχίστηκε μετά από πολυπαραγοντική ανάλυση προσαρμογή για άλλους προγνωστικούς μεταβλητές (HR 1,5 [95% CI 1.1 έως 2.3] Wald-p 0,031) (Πίνακας 2).

uPAR

S στο μεταναστευτικό μέτωπο και την επιβίωση στη φάση C όγκοι

Αξιολόγηση της έκφρασης του uPAR σε RC στρώμα που σχετίζεται με κύτταρα που χρησιμοποιούνται δύο διαφορετικές προσεγγίσεις. Πρώτον, η συνολική ένταση χρώσης στρωματικών βαθμολογήθηκε ως 0, 1, 2 και 3 (Σχ. 2β), με τον ίδιο τρόπο όπως και uPAR

E. Δευτερευόντως, η παρουσία των peritumoural τονισμό (uPAR

PT? UPAR έκφραση στο στρώμα, αλλά συγκεντρώνεται γύρω από τα καρκινικά κύτταρα) συγκρίθηκε με την απουσία της (Σχήμα 2γ).

Κεντρική περιοχή.. Η συνολική επιβίωση δεν σχετιζόταν σημαντικά με uPAR

S είτε για τα στάδια Β και Γ συνδυάζονται (p = 0,492), και μόνο το στάδιο Β (p = 0.071) ή το στάδιο C μόνο (p = 0,436). Η παρουσία ή η απουσία του υΡΑΚ

PT στην κεντρική όγκου δεν έδειξε σημαντική συσχέτιση με την επιβίωση των ασθενών.

Επεμβατική μπροστά. uPAR

S δεν συσχετίστηκε σημαντικά με τη συνολική επιβίωση για τις συνδυασμένες φάσεις B και Γ (p = 0.226) ή το στάδιο Β μόνη (p = 0,641). Ωστόσο, στο πλαίσιο της φάσης C, υπήρχε μια γενική τάση αύξησης της επιβίωσης ως uPAR έκφραση

S προχωρήσει από αρνητική σε ισχυρή (p = 0,015). Δεν υπήρξε καμία σημασία επιβίωση μεταξύ αρνητικών και μέτρια, ενώ υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ της μέτριας και ισχυρή (p = 0,031). Ως εκ τούτου, αρνητική σε μέτρια χρώση συνδυάστηκαν σε μία ενιαία κατηγορία και σε σύγκριση με ισχυρή έκφραση. Ισχυρή uPAR

έκφραση S συσχετίστηκε σημαντικά με την μεγαλύτερη συνολική επιβίωση (Σχήμα 3γ?. P = 0,009). Μετά από προσαρμογή για άλλους προγνωστικούς μεταβλητές αυτή η διαφορά παρέμεινε (HR 0,6 [95% CI 0.4-0.9] Wald-p = 0,007) (Πίνακας 3). Επιπλέον, η ομάδα C ασθενής στάδιο με uPAR

PT παρούσα στο μεταναστευτικό μέτωπο ιστών όγκου έδειξε επίσης μεγαλύτερο χρόνο επιβίωσης σε σύγκριση με τους ασθενείς χωρίς uPAR

PT (Εικόνα 3d?. P = 0,017) σε πολυπαραγοντική ανάλυση (HR 0,7 [95% CI 0,5-0,9] Wald-p 0,016) (Πίνακας 3).

η

uPAR στο παρακείμενο μη-νεοπλασματικές βλεννογόνους ιστούς

Για επιθήλια έκφραση uPAR στο διπλανό μη -neoplastic βλεννογόνους ιστούς (n = 312), 36 περιπτώσεις αποδεικνύεται ισχυρή έκφραση του uPAR (19 στο στάδιο Β και 17 στο στάδιο C), 58 περιπτώσεις είχαν μέτρια έκφραση (28 στο στάδιο Β και 30 στο στάδιο C), 81 περιπτώσεις είχε ασθενή έκφραση (41 στο στάδιο Β και 40 στο στάδιο C) και 137 περιπτώσεις ήταν αρνητικές (68 στο στάδιο Β και 69 στο στάδιο C). Στο στάδιο Β, δεν υπήρχε συσχέτιση μεταξύ ένταση χρώσης και την επιβίωση (ρ = 0,700), ενώ στο στάδιο C δεν υπήρχε διαφορά στην επιβίωση μεταξύ αρνητικών, αδύναμη και ενδιάμεσα. Η μόνη σημαντική συσχέτιση ήταν πλέον επιβίωσης για ισχυρή από ό, τι για τα αρνητικά (p = 0,018), αλλά, καθώς αυτό βασιζόταν σε μόνο 17 περιπτώσεις με ισχυρή χρώση, φάνηκε ανώμαλη και μπορεί να είναι ένα σφάλμα τύπου 1 που προκύπτουν από αυτό το μικρό αριθμό. έκφραση uPAR στο στρώμα ήταν σχεδόν απούσα, με αρνητική έκφραση σε 320 περιπτώσεις (156 στο στάδιο Β και 164 στο στάδιο C) και μόνο μέτρια έκφραση σε 9 περιπτώσεις (6 στο στάδιο Β και 3 στο στάδιο C), ανεπαρκή δείγματα έκφρασης uPAR ήταν διαθέσιμα για μια ολοκληρωμένη στατιστική ανάλυση.

Συζήτηση

Αν και η προγνωστική σημασία της uPAR στον καρκίνο έχει μελετηθεί εκτενώς, σημαντικές αποκλίσεις έχουν καταστήσει ένα μεγάλο μέρος της εργασίας ασαφή. Δύο σημαντικά ζητήματα παραμένουν ανεπίλυτα: πρώτον, η ασυμφωνία σχετικά με τους τύπους των κυττάρων, όπου uPAR υπερεκφράζεται (δηλαδή, uPAR

Ε ή uPAR

S), και, δεύτερον, η προγνωστική σημασία της uPAR σε διαφορετικούς τύπους κυττάρων και τα διάφορα στάδια της εξέλιξης του όγκου. Σε αυτή τη μελέτη έχουμε αντιμετωπίσει το πρώτο παράδοξο αποδεικνύοντας ότι η έκφραση του uPAR σε διαφορετικούς τύπους κυττάρων μπορεί να ανιχνευθεί χρησιμοποιώντας δύο επίτοπο-ειδικό αντι-ανθρώπινο uPAR MAbs # 3937 και R4. Αυτά τα αντισώματα που οριοθετείται μεταξύ uPAR

Ε και έκφραση uPAR

S σε ιστούς RC, που παρουσιάζει έκφραση αντιγόνου θα μπορούσε να ανιχνευθεί διαφορικά σε διαφορετικούς κυτταρικούς τύπους και τις θέσεις του όγκου στους ίδιους ιστούς RC. Κατά την εξέταση του υΡΑΚ

Ε και uPAR

S από 349 στάδιο Β ή ιστούς C RC, ήμασταν σε θέση να αποκρυπτογραφήσει το δεύτερο διαμάχη, αποκαλύπτοντας ότι τα αυξημένα uPAR

Ε τόσο στην κεντρική περιοχή και επεμβατική μπροστά όγκου αρνητικά συσχετίζεται με το στάδιο Β συνολική επιβίωση, ενώ αυξημένα uPAR

S στο μεταναστευτικό μέτωπο ευνοϊκά σχετίζεται με το στάδιο C συνολική επιβίωση.

Η αναγνώριση των διαφορετικών uPAR επιτόπων από διαφορετικά αντισώματα είναι ένας σημαντικός παράγοντας που πρέπει να εξεταστεί, δεν μόνο για την ανίχνευση σε διαφορετικούς τύπους κυττάρων, αλλά επίσης για τον προσδιορισμό του δυναμικού κλινική προγνωστική σχετικότητα του υΡΑΚ. Υπάρχουν πολλαπλές πολυκλωνικά αντισώματα αντι-uPAR (pAbs) και MAbs τα οποία έχουν αναπτυχθεί και μελετηθεί εκτεταμένα σε κλινικές εφαρμογές [6]. Από αυτά, τα MAbs # 3937 (όπως # 3936) και R4 (όπως R2) χρησιμοποιούνται πιο συχνά για uPAR

Ε και uPAR

ανίχνευσης S αντίστοιχα και να σταθεί στο κέντρο των διαφορετικών αποτελεσμάτων που λαμβάνονται από διαφορετικά εργαστήρια. Αρκετοί παράγοντες μπορούν να εξηγήσουν την ιδιαιτερότητα αυτών των διαφορετικών αντισωμάτων, τον πρωταρχικό στόχο να είναι δεσμευτική σε διαφορετικές «διαθέσιμη» επιτόπων αντικατοπτρίζοντας πιθανώς διαφορετικούς ρόλους του uPAR σε κάθε τύπο κυττάρου. Όπως uPAR έχει 42 γνωστούς εταίρους που αλληλεπιδρούν [5], είναι επίσης πιθανό ότι οι επίτοποι αντίσωμα μπορεί να επικαλυφθεί από άλλους εταίρους αλληλεπιδρώντας uPAR σε διαφορετικούς τύπους κυττάρων. Ο πολυλειτουργικός χαρακτήρας του υΡΑΚ είναι συνάρτηση της interactome του [3,5], και ως εκ τούτου uPAR ανιχνεύεται με διαφορετικό επίτοπο-ειδικά MAbs μπορεί να έχουν διαφορετικές αλληλεπιδρούν εταίρων, η οποία μπορεί να αντανακλά αποκλίνουσες λειτουργίες σε διακριτές κυτταρικούς τύπους. Αυτή η έννοια ενισχύεται από το γεγονός ότι ο πληθυσμός του διαλυτού uPAR (suPAR) σε συγκεκριμένους τύπους κυττάρων έχει δείξει διαμετρικά μεταβληθεί χρώσης που αντικατοπτρίζουν λειτουργικές διαφορές ως αποτέλεσμα δομικές παραλλαγές [25].