Αφηρημένο

Ο καρκίνος των ωοθηκών είναι η πιο κοινή αιτία θανάτου από γυναικολογικό καρκίνο. Η κατανόηση της βιολογίας της ασθένειας αυτής, ειδικότερα το πώς λεμφοκυττάρων και ινοβλαστών που σχετίζονται με όγκους συμβάλλουν στην εξέλιξη και τη μετάσταση του όγκου, έχει εμποδιστεί από την έλλειψη ενός κατάλληλου μοντέλου ξενομοσχεύματος όγκου. Αναφέρουμε ένα απλό και επαναλήψιμο σύστημα στο οποίο ο όγκος και το στρώμα του όγκου έχουν μεταμοσχευτεί επιτυχώς σε IL2Rγ

null (NSG) ποντίκια NOD-SCID. Αυτό επιτυγχάνεται με την έγχυση συσσωματώματα κυττάρων του όγκου που προέρχονται από φρέσκο ​​ιστούς ωοθηκών βιοψία όγκου (συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων του όγκου, και τα λεμφοκύτταρα που σχετίζονται με όγκους και ινοβλάστες) ε.π. σε NSG ποντίκια. εξέλιξης του όγκου σε αυτά τα ποντίκια παραλληλίζεται στενά πολλά από τα γεγονότα που παρατηρούνται σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών. Οι όγκοι δημιουργία στην επίπλουν, των ωοθηκών, του ήπατος, της σπλήνας, της μήτρας, και το πάγκρεας. Η ανάπτυξη του όγκου είναι αρχικά πολύ αργή και προοδευτική εντός της περιτοναϊκής κοιλότητας με απώτερο ανάπτυξη ασκίτη όγκου, αυθόρμητη μετάσταση στον πνεύμονα, την αύξηση των επιπέδων του CA125 στον ορό και ασκίτη, και η διατήρηση του σχετιζόμενου με τον όγκο ανθρώπινους ινοβλάστες και λεμφοκύτταρα που παραμένουν σε λειτουργία και να ανταποκρίνονται να κυτοκίνες για παρατεταμένες περιόδους. Με αυτό το μοντέλο θα είναι σε θέση να καθορίσουν τον τρόπο ινοβλάστες και λεμφοκύτταρα εντός μικροπεριβάλλον του όγκου μπορεί να συνεισφέρει στην ανάπτυξη και μετάσταση όγκου, και θα καταστήσει δυνατή την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας των θεραπευτικών μεθόδων που έχουν σχεδιαστεί για να στοχεύουν αυτά τα κύτταρα στο στρώμα του όγκου.

Παράθεση: Bankert RB, Μπαλού-Iyer SV, Odunsi Κ, Shultz LD, Kelleher RJ Jr, Barnas JL, et al. (2011) Ανθρωποποιημένα Mouse Μοντέλο καρκίνου των ωοθηκών ανακεφαλαιώνει Patient Solid Tumor Progression, ασκίτη Σχηματισμός, και μετάσταση. PLoS ONE 6 (9): e24420. doi: 10.1371 /journal.pone.0024420

Επιμέλεια: Sandra Orsulic, Cedars-Sinai Medical Center, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 30 Ιουνίου 2011? Αποδεκτές: 8, Αυγούστου 2011? Δημοσιεύθηκε: 15η Σεπτεμβρίου 2011

Copyright: © 2011 Bankert et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Η μελέτη υποστηρίχθηκε εν μέρει από ΝΙΗ CA34196 επιχορήγησης (LDS) και από ΝΙΗ Επιχορηγήσεις CA131407, CA108970 και AI079188 (RBB), T32AI1007614 (MSA), Ομάδα καρκίνου των ωοθηκών εργασίας επιχορήγησης του Ερευνητικού Ινστιτούτου για τον Καρκίνο (KO) και ΝΙΗ Grant HL-70227 (SB -ΕΓΏ). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

φυσιολογικών και νεοπλασματικών ανθρώπινους ιστούς έχουν επιτυχώς μεταμοσχευμένα εντός των κυττάρων Τ και Β κυττάρων με ανεπάρκεια

prkdc

scid (SCID)

ποντικούς. Η πρώτη επιτυχημένη μεταμόσχευση ανθρώπινων κυττάρων σε αυτά τα C.B-17

scid

ποντίκια είχε αναφερθεί πριν από 20 χρόνια [1]. Η χρήση των ξενομοσχευμάτων ανθρώπινου ιστού σε αυτές τις ανοσοανεπαρκείς ποντικούς οδήγησε έκτοτε στη γνώσεις σχετικά με τη βιολογία του ανθρώπινου καρκίνου, αυτοανοσίας και μολυσματικών ασθενειών [2]. Το δυναμικό της χρήσης πολλών διαφορετικών μοντέλων ξενομοσχεύματος ανθρώπινου όγκου για να μελετήσει και να αξιολογήσει τις θεραπείες κατά του καρκίνου, μαζί με τους περιορισμούς και τις παγίδες των μοντέλων έχει αναθεωρηθεί [3]. Ένα από τα μεγαλύτερα εμπόδια των προηγούμενων μοντέλα ξενομοσχεύματος ήταν η (HVG) απόκριση του ξενιστή έναντι μοσχεύματος που παρατηρήθηκε μετά την εμφύτευση ανθρώπινων ιστών. Ενώ

scid ποντίκια

έλειπε λειτουργικά Β και Τ κύτταρα, αυτά τα ποντίκια είχαν μια άθικτη έμφυτη ανοσοαπόκριση που ήταν υπεύθυνη για την πολύπλοκη κυτταρική και μοριακή ανταπόκριση HVG. Η ένταση αυτής της απόκρισης HVG διέφερε σημαντικά από ποντικό σε ποντικό και με τον ιστολογικό τύπο του όγκου που χρησιμοποιείται για εμφύτευση [3]. Αυξημένα επίπεδα της ανθρώπινης μεταμόσχευσης ιστών έχουν εξαρτιόταν κυρίως από τις γενετικές τροποποιήσεις των ανοσοανεπάρκεια ποντίκια υποδοχής [2]. Μια σημαντική ανακάλυψη ήταν η γενιά των ανοσοανεπαρκών ποντικών που είναι ομόζυγα για στοχευμένες μεταλλάξεις στο υποδοχέα ιντερλευκίνης-2 αλυσίδα γ locus [2]. Αυτά τα ποντίκια με σοβαρή βλάβη στην ανάπτυξη και λειτουργία των Τ-κυττάρων, Β κυττάρων και ΝΚ κυττάρων [2]. Ένα παράδειγμα αυτού του νέου τύπου του στελέχους ανοσοανεπάρκεια ποντίκι είναι το NOD.Cg-

Prkdc

scidIL-2rg

tm1Wjl

, συντομογραφία NSG. Οι ανοσοανεπαρκείς ποντικούς που στερούνται την αλυσίδα IL-2 γ υποδοχέα έχουν βρεθεί να υποστηρίξει την παρατεταμένη ενοφθαλμισμό ανθρώπινων αιμοποιητικών κυττάρων και μονοπύρηνα κύτταρα περιφερικού αίματος [2] καλύτερα από τις προηγούμενες στελέχη ανοσοατελούς ποντικού.

Ένα μοντέλο ξενομοσχεύματος στο οποίο ανθρώπινους όγκους και αυτόλογα σχετίζονται με τον όγκο Τ και Β κύτταρα θα μπορούσαν να συν-μεταμοσχευμένα και τις αλληλεπιδράσεις τους μελετηθεί

in vivo

θα δώσει την ευκαιρία για να καθορίσει πώς τα ανθρώπινα ανοσοϊκανά κύτταρα και κύτταρα του όγκου επηρεάζουν το ένα το άλλο. Τα ευρήματα θα μπορούσαν ενδεχομένως να χρησιμοποιηθούν για την αξιολόγηση ανοσοθεραπευτικές προσεγγίσεις σε καρκίνο. Περαιτέρω, εν όψει της αυξανόμενης ευαισθητοποίησης που κακοήθη στρωματικά κύτταρα, συμπεριλαμβανομένων ινοβλαστών, επιθηλιακά κύτταρα και άλλα λευκοκύτταρα αλληλεπιδρούν με και να έχουν επίδραση επί της ανάπτυξης του όγκου και των μεταστάσεων [4], η ανάπτυξη και η χρήση των μοντέλων στα οποία η μικροπεριβάλλον του όγκου διατηρείται στο ξενομόσχευμα είναι επίσης κρίσιμη για την απόκτηση γνώσεις σχετικά με την παθογένεση της εξέλιξης του όγκου. Με εμφύτευση μη διαταραχθεί κομμάτια των ανθρώπινων όγκων υποδορίως σε ποντικούς NSG, καθορίστηκαν ξενομοσχεύματα στην οποία η αρχιτεκτονική του ιστού, συμπεριλαμβανομένων των όγκων που σχετίζονται με τα λευκοκύτταρα, ινοβλάστες και τα στρωματικά κύτταρα του όγκου διατηρήθηκε και διατηρείται για παρατεταμένες χρονικές περιόδους [5]. Το μοντέλο αυτό αποδείχθηκε χρήσιμο για την απόδειξη της ικανότητας του εξωγενούς IL-12 που παραδίδονται από βιοαποικοδομήσιμες μικροσφαίρες να ενεργοποιήσει αδρανή μνήμης Τ κύτταρα εντός του μικροπεριβάλλον του όγκου [5]. Ωστόσο, επειδή αυτά τα ξενομοσχεύματα όγκου δεν ιδρύθηκαν ορθοτοπικώς, και μόνο περιορισμένες ενδείξεις όγκου διασποράς παρατηρήθηκε, το μοντέλο δεν αντικατοπτρίζουν με ακρίβεια τα πρότυπα της ανάπτυξης και μετάστασης που παρατηρούνται σε ασθενείς με καρκίνο, και ήταν, συνεπώς, περιορισμένη δυνητική αξία για τον εντοπισμό παραγόντων ότι συμβάλλει στην μετάσταση όγκου ή για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας των ανοσοθεραπευτικών πρωτοκόλλων.

Ένα μοντέλο ξενομοσχεύματος όγκου έχει αναπτυχθεί και έχει αναφερθεί εδώ στην οποία τα ανθρώπινα επιθηλιακά ξενομοσχεύματα όγκου των ωοθηκών εγκατεστημένος ορθοτοπικά, και το μοτίβο της ανάπτυξης του όγκου και των μεταστάσεων αντανακλά αυτό που παρατηρείται σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών. Tumor-σχετίζεται Τ και Β λεμφοκύτταρα και ινοβλάστες συν-εμφυτευθούν εντός οζίδια όγκων και τα Τ κύτταρα παραμένουν σε λειτουργία και να ανταποκρίνονται στις χορηγούνται εξωγενώς κυτοκίνης. CA125 είναι παρούσα στους ορούς και ασκίτη ποντικών που φέρουν όγκο CA125 + και παρέχει μια ευκαιρία για την παρακολούθηση της παρουσίας και της προόδου των ξενομοσχευμάτων όγκου περιοδικά. Αναμένεται ότι αυτό το μοντέλο θα καταστήσει δυνατή τη μελέτη της ικανότητας της ανθρώπινης σχετίζονται με όγκους και λευκοκύτταρα του όγκου στρώματος να διαμορφώνει

in situ

εξέλιξης του όγκου. Επιπλέον, το μοντέλο παρέχει τη δυνατότητα να αξιολογηθεί η αποτελεσματικότητα του ενιαίου, καθώς και συνδυασμός, οι θεραπευτικές προσεγγίσεις για τον καρκίνο των ωοθηκών.

Αποτελέσματα

Ανθρώπινα επιθηλιακών όγκων των ωοθηκών εμφυτεύονται ορθοτοπικά στην ωοθήκη και άλλο όργανο sites μετά την ένεση ενδοπεριτοναϊκή (ip) των κυττάρων αδρανών υλικών που προέρχονται από όγκους σε ποντίκια NSG

Όπως διαπιστώθηκε προηγουμένως ότι η υποδόρια εμφύτευση στερεά κομμάτια από φρέσκα ιστούς ανθρώπινου όγκου σε NSG ποντίκια είχε ως αποτέλεσμα τη δημιουργία μικροπεριβάλλοντα του όγκου [ ,,,0],5]. Τα πλεονεκτήματα αυτής της προσέγγισης έναντι των προηγούμενων μεθόδων ήταν ότι οι προκύπτοντες ξενομοσχεύματα διατηρείται αρχική τους αρχιτεκτονική, συμπεριλαμβανομένων λευκοκύτταρα που σχετίζονται με όγκους, στρωματικά ινοβλαστών και κυττάρων όγκου, καθώς και οι ξενομοσχεύματα επιβίωσαν για παρατεταμένες περιόδους χωρίς παρεμβολή HVG ή διήθηση των κυττάρων του ξενιστή. Ένας σημαντικός περιορισμός αυτής της προηγούμενης μοντέλο ξενομοσχεύματος ήταν ότι απέτυχε να αντανακλούν τα πρότυπα της ανάπτυξης του όγκου και εξάπλωση που παρατηρούνται σε ασθενείς με καρκίνο, και ορισμένοι όγκοι δεν εμφυτεύονται ή έχουν ως αποτέλεσμα σε ξενομοσχεύματα με μεγάλες περιοχές νέκρωσης που οφείλεται σε ανεπαρκή αγγειοποίηση του στερεά κομμάτια των όγκων.

Αναφέρουμε εδώ μια μέθοδος μεταμόσχευσης, στο οποίο οι όγκοι των ωοθηκών μπορεί να καθιερωθεί με επιτυχία ως ξενομοσχεύματα ορθοτοπικώς στην ωοθήκη και άλλες τοποθεσίες όργανο του παραλήπτη ποντίκια. Η ανάπτυξη του όγκου αντανακλά την πορεία και την εξέλιξη που παρατηρείται σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών. Αυτό έχει επιτευχθεί με την έγχυση ενός εναιωρήματος κυτταρικών συσσωματωμάτων (που προέρχεται από μια ήπια διαταραχή στερεών όγκων των ωοθηκών) ε.π. σε NSG ποντίκια (βλέπε Μέθοδοι ενότητα). Για να ασφαλίσει επιτυχή μεταμόσχευση του όγκου, οι ιστοί βιοψίας όγκου πρέπει να αποτελούνται από περιοχές βιώσιμου νεοπλασματικών κυττάρων που περιλαμβάνουν λεμφοκύτταρα που σχετίζονται με όγκους, και ινοβλάστες όπως φαίνεται στο Σχ. 1. Οι προέρχεται από όγκο-κυτταρικά εναιωρήματα που προκύπτουν από την διάσπαση των νωπών ιστών συμπαγούς όγκου περιέχει μικρές (διάμετρος 200-300 μm) συσσωματώματα των κυττάρων που περιλαμβάνουν CD45 + λευκοκύτταρα, κυτοκερατίνης θετικά καρκινικά κύτταρα, CD3 + Τ κύτταρα και τρίχρωμη θετική κολλαγόνου που είναι που παράγεται από ινοβλάστες (Σχ. 2Α-Ε). συσσωματώματα κυττάρων που προέρχονται από όγκους των ωοθηκών που λαμβάνονται από πέντε διαφορετικούς ασθενείς (πείραμα 1-5) εγχύθηκαν ί.ρ. σε NSG ποντίκια και τα ποντίκια αποδέκτες θυσιάζονται στους χρόνους που υποδεικνύονται στον Πίνακα 1. Ενώ παρατηρήθηκαν ιστολογικές ενδείξεις της προσάρτησης και ανάπτυξη των συσσωματωμάτων κυττάρων όγκου στο επίπλουν συντομότερο 8 ημέρες μετά την ε.π. εμβολιασμό (δεν παρουσιάζονται τα δεδομένα) ολική και ιστολογική ένδειξη όγκου και όγκου στρώματος εντός διαφορετικές θέσεις οργάνων (συζητείται παρακάτω) δεν καθορίστηκε μέχρι 80 να 177 ημέρες μετά τον εμβολιασμό (Πίνακας 1). Κανένας από τους ποντικούς έδειξαν εμφανή κλινικά συμπτώματα της ανάπτυξης όγκου κατά την διάρκεια των πρώτων 10 εβδομάδων της παρατήρησης μετά την εμβολιασμό του όγκου. Ο θάνατος ήταν συχνά το πρώτο σημάδι της μεταμόσχευσης του όγκου. Ένα ποντίκι από κάθε πείραμα πέθανε χωρίς αξιολόγηση, και δεν συμπεριλήφθηκε στην τελική ανάλυση

Ένα τμήμα ενός θηλώδους ορώδους αδενοκαρκίνωμα της ωοθήκης βάφονται με αιματοξυλίνη και ηωσίνη (Η &? Ε).. Φαίνεται σε 100 × μεγέθυνση και σε Β 400 × συστάδες μεγέθυνση των καρκινικών κυττάρων (Τ) που δείχνουν λεμφοκυτταρικής διήθησης (L), μαζί με ινώδη συνδετικό ιστό (F).

Η

Ιστολογία και ανοσοϊστοχημεία του όγκου προερχόμενο συσσωματώματα κυττάρων που προέρχονται από ήπια διάσπαση ενός πρωτογενούς όγκου ωοθηκών. Η &? Ε χρώση δείχνουν συστάδες κυττάρων διαφόρων μεγεθών (Α) Ανοσοϊστοχημική χρώση ανθρώπινης CD45 (Β) και CD3 (C) παρουσιάζει ενδείξεις ανθρώπινων λευκοκυττάρων και Τ κύτταρα, δηλ σκούρο καφέ χρώση κυττάρων. Trichrome χρώσης (D) αποκαλύπτει την παρουσία κολλαγόνου το οποίο παράγεται από ινοβλάστες και τους λεκέδες γαλαζοπράσινο. Τα καρκινικά κύτταρα χρώση σκούρο καφέ με ανοσοϊστοχημική χρώση για κυτοκερατίνη (Ε). Όλα τα στοιχεία είναι 400 × μεγέθυνση.

Η

Τα οζίδια ανιχνεύεται κατάφωρα μέσα στην περιτοναϊκή κοιλότητα των ποντικών εγχέεται με συσσωματώματα κυττάρων που προέρχονται από όγκους επιβεβαιώθηκαν ιστολογικά να είναι όγκοι (Εικ. 3AA και 3AB). Τα οζίδια όγκου μεταβάλλεται σε διάμετρο από 2 mm έως 10 mm και ήταν πιο συχνά παρατηρούμενες εντός ή κοντά στην περιοχή του επίπλουν, δηλαδή δίπλα στο στομάχι, σπλήνα και το πάγκρεας. Σε μερικούς όγκους ποντικοί παρατηρήθηκαν χονδροειδώς στην επιφάνεια του σπλήνα και του ήπατος. Για να προσδιοριστεί εάν οι όγκοι είχαν εξαπλωθεί και σε άλλες περιοχές του οργάνου μέσα στην περιτοναϊκή κοιλότητα, ελήφθησαν, σταθερό και χρωματίζονται τμήματα του κάθε οργάνου. Σύκο. 3AC-3Ag αποκαλύπτουν την παρουσία όγκου στην ωοθήκη, periovarian λίπος, του παγκρέατος, της μήτρας, του σπλήνα και το ήπαρ από ένα ποντίκι θυσιάστηκε 140 ημέρες μετά την ένεση του κυττάρου aggreages που προέρχεται από όγκο (Πείραμα 4 #).

Η & ? χρώση Ε παρουσιάζει ενδείξεις όγκου (βλέπε βέλη) στην περιτοναϊκή οζίδιο από το επίπλουν (Αα και Αβ), των ωοθηκών και periovarian λίπους (Ac), του παγκρέατος (Ad), της μήτρας (AE), σπλήνα (AF), και το ήπαρ (Ag) . Αυτοί οι όγκοι προέκυψαν από την ε.π. ένεση συσσωματωμάτων κυττάρων που προέρχονται από όγκους που προέρχεται από ένα θηλώδες ορώδες καρκίνωμα της ωοθήκης. Τα ποντίκια θυσιάστηκαν 140 ημέρες μετά τον εμβολιασμό. Λεμφοκύτταρα (βέλος) παρατηρήθηκαν σε αντιπαράθεση με ένα καρκινικό κύτταρο (βέλος) (Βα). Ανοσοϊστοχημική χρώση (Β) δείχνει την παρουσία της ανθρώπινης CD45 + λευκοκύτταρα (Bb), CD3 + Τ κύτταρα (Bc), CD20 + Β κύτταρα (Bd), κύτταρα CD138 + πλάσματος (Be), και HLA + οζίδιο όγκου πλησίον της ωοθήκης (BF). Τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων φαίνεται από θετική χρώση με Ki67 (BG), και τα αποδεικτικά στοιχεία των ινοβλαστών στρωματικών φαίνεται από τρίχρωμης χρώση του κολλαγόνου βλέπε βέλη (Bh). κεφαλής βέλος δείχνει τα καρκινικά κύτταρα. Όλα τα τμήματα σε Α είναι 100 × μεγέθυνση και σε Β τα τμήματα είναι στα 400 χ μεγέθυνση.

Η

Η συχνότητα των όγκων παρατηρήθηκαν ιστολογικά σε διαφορετικές τοποθεσίες όργανο κυμαινόταν από όγκο σε όγκο και από ποντικό σε ποντικό για κάθε που προέρχονται από όγκους κυτταρικού συσσωματώματος εμφυτεύεται. Σε ένα τυπικό παράδειγμα της κατανομής οργάνου σε 15 ποντίκια, 116 ημέρες μετά την ε.π. ένεση συσσωματωμάτων κυττάρων που προέρχονται από στερεούς όγκους των ωοθηκών (Πείραμα 5Α, Πίνακας 1), η ιστολογική ένδειξη όγκου ανιχνεύθηκε σε ωοθήκη από 10 ποντικούς, σπλήνα 10 ποντικών, το ήπαρ των 8 ποντικών, και της μήτρας του 2 ποντίκια. Θεωρείται πιθανό ότι αυτή η συμμετοχή ιστοσελίδα οργάνων είναι μια υποτίμηση της πραγματικής συχνότητας των όγκων σε διάφορα όργανα, διότι μόνο μια μικρή περιοχή του κάθε οργάνου εξετάστηκε ιστολογικά.

Ανθρώπινο CD45 +, CD3 +, CD20 +, CD138 + λευκοκύτταρα , ινοβλάστες και στα πολλαπλασιαζόμενα καρκινικά κύτταρα είναι παρόντα στο μικροπεριβάλλον νεοπλασματικών ξενομοσχευμάτων

τμήματα οζιδίων όγκου απομακρύνεται από την περιτοναϊκή κοιλότητα και χρωματίστηκαν με αιματοξυλίνη και ηωσίνη αποκάλυψε περιοχές στις οποίες λεμφοκύτταρα (βλέπε βέλος) ήταν παρούσες σε παράθεση με όγκο κύτταρα (βλέπε κεφαλή βέλους) (Εικ. 3βα). Ανοσοϊστοχημική χρώση του ιστού διαπιστώθηκε ότι τα λεμφοκύτταρα που σχετίζονται με όγκους ήταν ανθρώπινα CD45 + και περιλαμβάνονται CD3 + Τ κύτταρα, CD20 + Β κυττάρων, και CD138 + κύτταρα πλάσματος (Σχ. 3ββ-Be). Τα καρκινικά κύτταρα χρωματίστηκαν θετικά για το HLA Τάξης Ι (Εικ. 3Bf), και συμμετέχουν ενεργά διαιρούμενα Κί67 θετικά κύτταρα (Σχ. 3Bg).

Μια τρίχρωμη χρώση των οζιδίων του όγκου έδειξε ότι εκτός από τα φλεγμονώδη κύτταρα, ινοβλάστες ήταν παρόντα εντός του μικροπεριβάλλοντος των ξενομοσχευμάτων όγκου (βλέπε βέλος) (Εικ. 3Bh). Οι ινοβλάστες χρωματίζονται θετικά για το HLA Τάξης Ι (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Καταλήγουμε στο συμπέρασμα ότι η ιστολογική αρχιτεκτονική και κυτταρική σύνθεση, συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων του όγκου, φλεγμονώδη λευκοκύτταρα και ινοβλάστες του αρχικού καρκινικού ιστού διατηρούνται για παρατεταμένες περιόδους (μέχρι και σε 177 ημέρες μετά την εμφύτευση) σε ξενομόσχευμα όγκου, και ότι τα καρκινικά κύτταρα συνεχίζουν να πολλαπλασιάζονται εντός των οζιδίων όγκου που υπάρχουν στην περιτοναϊκή κοιλότητα.

Tumor Ασκίτης Ανάπτυξη στην NSG ποντίκια που εμβολιάστηκαν με ωοθηκών που προέρχεται από όγκο κυτταρικών συσσωματωμάτων

ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών συνήθως την ανάπτυξη ενός ασκίτη όγκου σε προχωρημένα στάδια της νόσου τους [6], [7]. Για να καθοριστεί εάν ο ασκίτης όγκου αναπτυχθεί στο μοντέλο ξενομοσχεύματος όγκου, οι ποντικοί NSG παρακολουθήθηκαν για παρατεταμένες περιόδους μετά την ί.ρ. ενοφθαλμισμό των κυτταρικών συσσωματωμάτων που προέρχονται από όγκους. Διευρυμένη κοιλίες παρατηρήθηκαν σε ποντικούς με 14 εβδομάδες μετά την ένεση του όγκου που υποδηλώνει την παρουσία ασκίτη. Η παρακέντηση επιβεβαίωσε την παρουσία του ασκιτικού υγρού στην περιτοναϊκή κοιλότητα των ποντικών. Για να καθοριστεί εάν βιώσιμα καρκινικά κύτταρα ήταν παρόντα εντός του υγρού ασκίτη, τα υγρά ασκίτη από ποντίκια που φέρουν όγκο (που παράγεται από την ε.π. εμβολιασμό των κυτταρικών συσσωματωμάτων που προέρχονται από όγκους των ωοθηκών από τρεις διαφορετικούς ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών) εγχύθηκαν ί.ρ. σε αφελείς NSG ποντίκια. Ογδόντα επτά έως 94 ημέρες μετά τον εμβολιασμό τα ποντίκια είχαν ιστολογική ένδειξη ανάπτυξης όγκου στην ωοθήκη, μήτρα, ήπαρ, σπλήνα και τον πνεύμονα (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Τα περισσότερα από αυτά δευτερεύοντες παραλήπτες είχαν επίσης αναπτύξει ασκίτη από αυτή τη φορά. Αυτά τα αποτελέσματα αποδεικνύουν τόσο την παρουσία βιώσιμων κυττάρων όγκου στο ρευστό ασκίτη του αρχικού ποντικών που φέρουν όγκο, και την ικανότητα να υπο-πέρασμα του όγκου και έτσι επεκτείνει τον αριθμό των ποντικών με ξενομοσχεύματα όγκου. Οι όγκοι έχουν πλέον επιτυχώς υπο-περάστηκαν τρεις φορές. Μετά το τρίτο πέρασμα των μοσχευμάτων όγκων φαίνεται να είναι σε μεγάλο βαθμό άνευ ανθρώπινους ινοβλάστες που σχετίζονται με όγκο και τα λεμφοκύτταρα που σχετίζονται με όγκο.

Παρουσία του CA125 στον ορό και ασκίτη των ωοθηκών που φέρουν όγκο NSG Ποντίκια

CA125 είναι ένα μοριακό γλυκοπρωτεΐνη υψηλού βάρους που είναι αυξημένη στον ορό των περίπου 90% των ασθενών με προχωρημένο επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών [8], [9], και χρησιμοποιείται για την παρακολούθηση της προόδου του όγκου και η απόκριση στη χημειοθεραπεία σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών [8]. Επειδή η μόνη κλινικό σύμπτωμα της ανάπτυξης του όγκου στα ποντίκια ήταν ασκίτης όγκου που εμφανίστηκε πολύ αργά, ήταν ενδιαφέρον να προσδιορισθεί αν τα επίπεδα CA125 μπορούσε να ανιχνευθεί στους ποντικούς NSG εμφυτευμένα με τις κυτταρικές συσσωματώματα που προέρχονται από όγκους των ωοθηκών, και να διαπιστωθεί κατά πόσον αυτό το δείκτη θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για να παρακολουθεί περιοδικά την παρουσία και την εξέλιξη των ανθρώπινων όγκων σε ποντικούς μετά τον εμβολιασμό του όγκου. Τα συσσωματώματα κυττάρων που προέρχονται από στερεούς όγκους τριών διαφορετικών ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών με αυξημένα επίπεδα ορού (& gt? 500 U /ml) του CA125. Κάθε μία από τις τρεις κυτταρικές συσσωματώματα που προέρχονται από όγκους ενέθηκαν ε.π. σε 10 NSG ποντικούς και τα επίπεδα CA125 στον ορό και ασκίτη αναλύθηκαν σε διαφορετικούς χρόνους μετά τον εμβολιασμό του όγκου. Με 80 ημέρες μετά τον εμβολιασμό όγκου, CA125 ήταν παρούσα στον ασκίτη και οι οροί όλων των ποντικών εμβολιάσθηκαν με όγκους που προέρχονται από τους τρεις διαφορετικούς ασθενείς. Σε μία από τις τρεις ομάδες ποντικών, τα ζώα υποβλήθηκαν σε αφαίμαξη σε τακτά χρονικά διαστήματα και τα επίπεδα του CA125 στον ορό προσδιορίστηκε. Το CA125 στον ορό αυξήθηκε με τον χρόνο φθάνοντας ένα επίπεδο μεγαλύτερο από 500 μονάδες /ml 100 ημέρες μετά που προέρχεται από όγκο κυτταρικών συσσωματωμάτων εμβολιασμό. Η ποσότητα του CA125 στον ασκίτη διέφεραν σημαντικά από όγκο σε όγκο φθάνοντας σε επίπεδα από 400-5800 μονάδες /ml 85-116 ημέρες μετά που προέρχεται από όγκο κυτταρικών συσσωματωμάτων εμβολιασμό. Η ικανότητα να ανιχνεύει CA125 στον ορό και ο ασκίτης του ξενομοσχεύματος όγκου ποντικών που φέρουν είναι αντανακλαστική ενός ακόμη συμβάν που παρατηρείται σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών, και αποτελεί σημαντική καθώς παρέχει έναν τρόπο για να παρακολουθεί περιοδικά την παρουσία και την εξέλιξη του όγκου, και, τελικά, για την αξιολόγηση της θεραπευτικής αποτελεσματικότητας των διαφόρων θεραπευτικών πρωτοκόλλων.

μεταστατική εξάπλωση των ωοθηκών Ξενομοσχεύματα όγκου από την κοιλιακή κοιλότητα στο χώρο του υπεζωκότα

η ενδοκοιλιακή εξάπλωσης ότι παρατηρούνται μετά την ip ενοφθαλμισμό των κυττάρων του όγκου που προέρχεται από ωοθηκικό συναθροίζει σε NSG ποντίκια, και η παραγωγή του όγκου υγρού ασκίτη είναι σύμφωνο με αυτό που παρατηρείται στο Στάδιο IIIc ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών [7]. Σε αυτό το στάδιο η νόσος μπορεί να περιλαμβάνει την επίπλουν, μεσεντέριο του εντέρου, κοιλιακός περιτοναϊκή επιφάνειες, επιφάνεια ορογόνου υμένα του εντέρου και του διαφράγματος. Οι ποντικοί που είχαν αναπτύξει ασκίτη όγκου από 16 εβδομάδες μετά την ε.π. έγχυση κυτταρικών συσσωματωμάτων που προέρχονται από όγκους, είχε μεικτό ένδειξη όγκων στις επιφάνειες ορογόνο του εντέρου και επίπλουν και εξετάστηκαν προσεκτικά για διαφραγματικής εμφυτεύματα όγκου. Gross ενδείξεις πιθανής αύξησης όγκου παρατηρήθηκε επί του διαφράγματος 12 από τους 15 ποντικούς που εμβολιάσθηκαν με τις κυτταρικές συσσωματώματα που προέρχονται από όγκους. Η ιστολογική ανάλυση επιβεβαίωσε την παρουσία της ανάπτυξης του όγκου στο διάφραγμα (Εικ 4Α.)

Η &?. Χρώσης Ε (100 × μεγέθυνση) αποκαλύπτει την παρουσία όγκου στο διάφραγμα (Α), και στον πνεύμονα 100 × μεγέθυνση (Β) και 400 × μεγέθυνση (C). Η ανοσοϊστοχημική χρώση του όγκου στον πνεύμονα για HLA Τάξης I (D) ορίζει ότι οι όγκοι αυτοί είναι ανθρώπινης προέλευσης. Οι τομές έγιναν από τους ιστούς ενός ποντικού 16 εβδομάδες μετά την ε.π. ένεση ενός αναστολής όγκου = προέρχονται κυτταρικών συσσωματωμάτων.

Η

ασθενείς με νόσο σταδίου IV του παρόντος με στοιχεία εξω-κοιλιακή εξάπλωση του όγκου και αυτό μπορεί να περιλαμβάνει τη υπεζωκότα χώρο με μετάσταση στο πνευμονικό παρέγχυμα [7 ]. Ενώ καμία ακαθάριστο ενδείξεις μετάστασης όγκου σε ποντικούς παρατηρήθηκε με 16 εβδομάδες μετά που προέρχεται από όγκο κυτταρικών συσσωματωμάτων εμβολιασμό, η ιστολογική ανάλυση των πνευμόνων αποδείχθηκε ότι μικρο-μετάσταση του όγκου από την περιτοναϊκή κοιλότητα είχε συμβεί σε 4 από τους 15 ποντικούς. Μικρές εστίες των όγκων παρατηρήθηκαν στον πνεύμονα (σχ. 4Β, C) χρωματίστηκαν θετικά για το HLA Τάξης Ι (Εικ. 4D). Ο αριθμός των ποντικών με μετάσταση πνεύμονα είναι πιθανό μια υποεκτίμηση, καθώς μόνο ένα μικρό μέρος του πνεύμονα εξετάστηκε ιστολογικά.

συλλογική ευρήματα μας δείχνουν ότι η αργή και προοδευτική μοτίβο της ανάπτυξης του όγκου και τη μετάσταση των όγκων των ωοθηκών σε ποντίκια NSG μετά την ip εμβολιασμό του φρέσκου ανθρώπινου αδρανών ωοθηκών προέρχεται από όγκο κυττάρων στενά αντανακλά αυτό που παρατηρήθηκε σε ασθενείς που αναπτύσσουν σε στάδια IIIc και IV της νόσου, η οποία αντιπροσωπεύει πάνω από το 70% των ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών δει στην κλινική [7].

Ανθρώπινα Τ κύτταρα που υπάρχουν σε ξενομοσχεύματα παράγουν IFN-γ κατά την ενεργοποίηση με εξωγενή IL-12 και το πλάσμα κύτταρα ιδιοσυστατικά παράγουν ανοσοσφαιρίνη (Ig)

Τα λεμφοκύτταρα συμπεριλαμβανομένης της μνήμης τελεστών CD4 + Τ κύτταρα [10], NY-ESO-1 όγκου ειδικών CD8 + Τ κύτταρα [11], CD4 + και CD8 + Τ κύτταρα ρυθμιστικά [12] – [14], και τα κύτταρα Th17 [15], έχουν βρεθεί μέσα μικροπεριβάλλοντα όγκου ωοθηκών. Αυτά και άλλα λευκοκύτταρα που διηθούν όγκο έχει αποδειχθεί ότι σχετίζεται τόσο με την ενίσχυση και την αναστολή της εξέλιξης του όγκου [16]. Θα ήταν ενδιαφέρον και σημασία για την πιθανή χρησιμότητα του εξανθρωπισμένου μοντέλο ποντικού μας να διαπιστώσει αν τα λεμφοκύτταρα που σχετίζονται με όγκους που βρέθηκαν στα ξενομοσχεύματα όγκου παρέμειναν βιώσιμα και λειτουργικά. Αφού διαπιστώθηκε με ανοσοϊστοχημεία την παρουσία της ανθρώπινης CD45 + λευκοκύτταρα CD3 + Τ κυττάρων, CD20 + Β κυττάρων και CD138 + κυττάρων πλάσματος στο μικροπεριβάλλον του όγκου ξενομοσχευμάτων καταρτίζεται μετά τη ε.π. έγχυση κυτταρικών συσσωματωμάτων που προέρχονται από όγκους (Σχ. 3Β), η βιωσιμότητα και η ικανότητα αυτών των κυττάρων να ανταποκρίνονται στην εξωγενή διέγερση κυτοκίνης

in vivo

ερευνήθηκαν.

Έχουμε αποδείξει προηγουμένως ότι T κύτταρα στο μικροπεριβάλλον του όγκου έχουν εξασθενημένο σήμα ΤΟΚ οδηγείται ενεργοποίησης, αλλά παραμένουν βιώσιμα και αποκρίνονται σε διέγερση με IL-12 με την παραγωγή ΙΡΝ-γ [17], [18]. Εάν τα κύτταρα Τ που υπάρχουν στα ξενομοσχεύματα όγκου παρέμειναν βιώσιμα προβλέψαμε ότι θα υπάρξει μια σημαντική αύξηση της ΙΡΝ-γ στους ορούς των ποντικών που φέρουν όγκο μετά την θεραπεία των ποντικών με IL-12 [19]. Ποντικών που φέρουν όγκο (21 ημέρες μετά τον εμβολιασμό του όγκου) εγχύθηκαν ί.ρ. είτε με ανθρώπινο φορτωμένα λιποσώματα IL-12 (50 μg IL-12 ανά ποντικό) ή τον έλεγχο (άδειο) λιποσώματα, και οι οροί τους αναλύθηκαν 5 ημέρες αργότερα για την παρουσία της ανθρώπινης IFN-γ. Ενώ το επίπεδο της ΙΡΝ-γ στον ορό των ποντικών που υπέστησαν αγωγή IL-12 κυμαινόταν από ποντικό σε ποντικό, 9 στους 10 από αυτούς τους ποντικούς έδειξαν σημαντικά αυξημένα επίπεδα της IFN-γ (233 έως 5.392 μg /ml) (Πίνακας 2) . Όλα 5 των ποντικών που φέρουν όγκο σε επεξεργασία με λιποσώματα μάρτυρες είχαν χαμηλότερα επίπεδα της ΙΡΝ-γ που κυμαίνονται από 32-88 pg /ml ορού. Αυτά τα αποτελέσματα προτείνουν ότι τα ανθρώπινα σχετίζονται με όγκους λεμφοκύτταρα Τ, και, ενδεχομένως, τα κύτταρα ΝΚ, που υπάρχει στην ποντικών που φέρουν όγκο είναι βιώσιμες και αποκρίνονται σε IL-12. Η μονή αγωγή με IL-12 δεν είχε ως αποτέλεσμα σημαντική μείωση στην πρόοδο του όγκου σε σύγκριση με τους ποντικούς ελέγχου. Οι μελλοντικές μελέτες πρόκειται να εκτιμηθεί η επίδραση των πολλαπλών θεραπειών των ποντικών με IL-12 είτε μόνη της είτε σε συνδυασμό με χημειοθεραπεία.

Η

Η βιωσιμότητα και λειτουργία των Β κυττάρων και των κυττάρων πλάσματος στο ποντικών που φέρουν όγκο αντιμετωπίστηκαν με προσδιορισμό του ορών για την παρουσία ανθρώπινου Ig. Παρατηρήσαμε σταθερά υψηλά επίπεδα ανθρώπινης Ig στους ορούς των ποντικών που φέρουν όγκο (Πίνακας 2). Σε ένα αντιπροσωπευτικό πείραμα, τα αυξημένα επίπεδα της Ig παρατηρήθηκαν σε ποντίκια 78 ημέρες μετά τη θεραπεία και στις δύο IL-12 και από συγκριτικούς ποντικούς, και καμία συνεπής ενίσχυση των επιπέδων ορού Ig έχει ακόμη παρατηρηθεί σε απόκριση σε IL-12.

Η παρουσία και των δύο λειτουργικών σχετίζονται με όγκους Τ και Β κυττάρων στο ξενομόσχευμα ποντικών που φέρουν όγκο για & gt? 100 ημερών εξασφαλίζει μια ευκαιρία να ερευνήσει την πιθανή ρόλο ότι αυτά τα λεμφοκύτταρα (και τα βιολογικώς δραστικών παραγόντων που παράγουν, δηλαδή κυτοκίνες και τα αντισώματα ) παίζουν στην επιβίωση και τη μετάσταση του όγκου, και να διαπιστώσει αν είναι δυνατόν να χειριστούν αυτά τα λεμφοκύτταρα, έτσι ώστε να εξαπολύσουν μια αποτελεσματική απάντηση αντι-όγκου

in situ

.

Συζήτηση

από την πρώτη έκθεση σχετικά με την επιτυχή εμφύτευση των ανθρώπινων κυττάρων στο CB-17-SCID [1], έχουν αρκετές χιλιάδες έγγραφα έχουν δημοσιευθεί σχετικά με τη χρήση αυτών και άλλων ανοσοανεπάρκεια ποντίκια για να εμφυτευθούν τα ανθρώπινα κακοήθη και μη κακοήθεις ιστούς σε μελέτες του ανθρώπινου καρκίνου, αιματοποίηση, προσαρμοστικές και έμφυτη ανοσία, μολυσματικές ασθένειες, αυτοανοσία και αναγεννητική ιατρική [2]. Οι μοντέλα ποντικιού έχουν χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων και να αξιολογήσει προκλινικά την θεραπευτική αποτελεσματικότητα των στρατηγικών που βασίζονται και μη-άνοση ανοσολογικές θεραπεία για τον καρκίνο. Περιορισμοί αυτών τα προηγούμενα μοντέλα περιλαμβάνεται μια σημαντική έμφυτη ανοσολογική απόκριση των δικαιούχων ποντίκια που περιόρισε τη διάρκεια του μοσχεύματος και έκανε δύσκολη την ερμηνεία των αποτελεσμάτων των θεραπευτικών μελετών αποτελεσματικότητας. Αυτά τα μοντέλα ξενομοσχεύματος απέτυχε να ανακεφαλαιώσω τις τοποθεσίες και τα πρότυπα της ανάπτυξης του όγκου και τα περισσότερα από τα μοντέλα συν-μεταμόσχευση των στρωματικών κυττάρων με ο όγκος δεν ιδρύθηκε [3].

Αναφέρουμε εδώ ένα εξανθρωπισμένο μοντέλο ότι πιο στενά παραλληλίζει τα πρότυπα της εξέλιξης όγκων που παρατηρούνται σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών από ότι οποιοδήποτε άλλο μοντέλο που περιγράφηκε προηγουμένως. Το μοντέλο μας συλλαμβάνει πολλές σημαντικές λειτουργίες του ανθρώπινου καρκίνου των ωοθηκών δεν έχουμε δει σε προηγούμενα μοντέλα. Η ενδο-κοιλιακή εξάπλωση μαζί με την ανάπτυξη του ασκίτη είναι εντυπωσιακά παρόμοια με αυτό που παρατηρήθηκε σε ασθενείς. Η συν-μεταμόσχευση ινοβλαστών που σχετίζονται με όγκους και Τ και Β λεμφοκύτταρα που παραμένουν βιώσιμα και λειτουργικά για παρατεταμένες περιόδους παρέχει την ευκαιρία να διερευνηθεί η πιθανή συμβολή αυτών των μη-κακοήθη κύτταρα, καθώς και τα βιολογικώς δραστικών παραγόντων που παράγουν, για την ανάπτυξη και την εξάπλωση των κυττάρων του όγκου.

Η ορθοτοπική εμφύτευση και η διάδοση του όγκου και συν-μεταμόσχευση του που σχετίζονται με όγκους ανοσοϊκανά κύτταρα με στρώματος του όγκου σε αυτό το νέο εξανθρωπισμένο μοντέλο ποντικού καθιστούν δυνατή τη μελέτη

in vivo

η αλληλεπίδραση μεταξύ λεμφοκυττάρων και του όγκου, λεμφοκύτταρα και ινοβλάστες που σχετίζονται με όγκους και ινοβλάστες και του όγκου. Έχει προηγουμένως αποδειχθεί ότι στρώματος του όγκου είναι κρίσιμη για την πρόληψη ή επιτρέπουν την ανοσολογική καταστροφή των καρκινικών κυττάρων [20]. Το έργο αυτό επιβεβαιώθηκε αργότερα [21] και στη συνέχεια επεκτάθηκε που δείχνουν ότι το στρώμα του όγκου οδηγεί σε Τ κύτταρο εκρίζωση του καθιερωμένου όγκου [22]. Ώριμο

et al.

Έδειξε ότι ινοβλάστες που προέρχονται από ανθρώπινα καρκινώματα μαστού επεμβατικές ενίσχυσε σημαντικά την ανάπτυξη του όγκου σε μοντέλα ξενομοσχεύματος [23]. Οι όγκου που σχετίζεται με ινοβλάστες έχουν δειχθεί από άλλους για να ενισχύσει ή να καταστείλει τη λειτουργία των Τ κυττάρων [24] – [26] και υποσύνολα όγκου που σχετίζεται με τα Τ κύτταρα είναι γνωστό ότι αλληλεπιδρούν με κύτταρα όγκου και αμοιβαίως διαμορφώνουν ο ένας τον άλλο [27]. Είτε ινοβλαστών ή λευκοκύτταρα παρόν στην ανθρώπινη μικροπεριβάλλοντα όγκου ενισχύσουν ή /και καταστέλλουν τους όγκους μένει να καθοριστεί [28], [29]. Με καταστρέφουν, λειτουργικά αναστολή ή ενεργοποίηση συγκεκριμένα υποσύνολα των κυττάρων εντός των κυτταρικών συσσωματωμάτων που προέρχονται από όγκους πριν από τον εμβολιασμό σε NSG ποντικούς Η επίδραση επί της μεταμόσχευση και την επακόλουθη ενδοκοιλιακές εξάπλωση και μετάσταση στον εξω-κοιλιακή υπεζωκότα χώρος μπορεί να καθοριστεί, με τον τρόπο αυτό για την ίδρυση τα οποία κύτταρα στο μικροπεριβάλλον του όγκου συμβάλει στην σύλληψη του όγκου ή την ενίσχυση της προόδου όγκου.

Ο καρκίνος των ωοθηκών είναι η πιο συχνά ασυμπτωματική στα αρχικά της στάδια, όπως οι περισσότεροι ασθενείς έχουν εκτεταμένη νόσο κατά το χρόνο της διάγνωσης [30]. Νέες γνώσεις σχετικά με την παθογένεση και την προέλευση των ορώδες καρκίνου των ωοθηκών μπορεί τελικά να οδηγήσει σε μια προηγούμενη διάγνωση της ασθένειας αυτής. Αυξανόμενα στοιχεία έχει δείξει ότι οι περισσότερες ή όλες τις υψηλής ποιότητας ορώδες καρκίνωμα των ωοθηκών προέρχονται σάλπιγγες [31], [32]. Αυξημένα επίπεδα CA125 (μια πρωτεΐνη του καρκινικού δείκτη) ορό βρίσκονται σε & gt? 90% των ασθενών με προχωρημένο καρκίνο των ωοθηκών στάδιο, αλλά συγκριτικά λίγοι ασθενείς με νόσο Σταδίου Ι είναι CA125 θετικές. Παρομοίως ποντικοί εμβολιάσθηκαν ί.ρ. με κύτταρο συσσωματώματα που προέρχονται από όγκους δεν παρουσιάζουν κλινικές ενδείξεις όγκων για τουλάχιστον 80 ημέρες, όταν τα αυξημένα επίπεδα CA125 στον ορό παρατηρήθηκε μόνο. Το επίπεδο ΟΑ125 ορό στη συνέχεια αυξήθηκαν ραγδαία φθάνοντας σε επίπεδα άνω των 500 μονάδων /ml την ημέρα 100 μετά τον εμβολιασμό. Αυτή τη στιγμή και πέρα ​​τα ποντίκια εμφάνισαν μια παθολογία ανάλογα με το στάδιο IIIc και IV του καρκίνου των ωοθηκών, δηλαδή απόδειξη ενδοκοιλιακής εξάπλωση σε πολλαπλές θέσεις οργάνων, διαφραγματική εμφυτεύματα, ανάπτυξη ασκίτη όγκου και εξω-κοιλιακή εξάπλωση στην υπεζωκοτική χώρο με μεταστάσεις στον πνεύμονα [7].

Έτσι, ενώ τα επίπεδα CA125 είναι ένας αξιόπιστος δείκτης της παρουσίας και την επέκταση των όγκων των ωοθηκών σε ασθενείς και σε ανθρωποποιημένα μοντέλο ποντικού μας, δεν είναι κατάλληλο για την έγκαιρη ανίχνευση όγκων σε ασθενείς είτε ή σε ποντίκια που εμβολιάστηκαν με τις κυτταρικές συσσωματώματα που προέρχονται από όγκους. Ωστόσο, τα επίπεδα του CA125 στον ορό χρησιμοποιούνται σήμερα αποτελεσματικά για την παρακολούθηση της απόκρισης των ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών »στη χημειοθεραπεία και χειρουργική επέμβαση [8]. Αυτό βιοδείκτης έχει επίσης χρησιμοποιηθεί ως προγνωστικός δείκτης για ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών. Αναμένουμε ότι τα επίπεδα CA125 στον ορό θα είναι επίσης ένα πολύ χρήσιμο ποσοτικά δείκτη για την παρακολούθηση σε τακτά χρονικά διαστήματα και να συγκρίνει

in vivo

θεραπευτικά αποτελέσματα σε εξανθρωπισμένο μοντέλο ποντικού μας.

Η ενισχυμένη ικανότητα των μικρών μακροοικονομικών μεγεθών των όγκων και μη-κακοήθη καρκινικά κύτταρα για τη δημιουργία, την ανάπτυξη και εξάπλωση εντός της περιτοναϊκής κοιλότητας (σε σύγκριση με τα στερεά μη διαταραχθεί τεμάχια ιστού του όγκου) μπορεί να εξαρτάται από την ικανότητα των μικρών συστάδων κυττάρων να επιβιώσουν αρχικά μέχρις ότου καθοριστεί επαρκής αγγειακή παροχή για να επιτρέπει διαστολή του όγκου . Η επιτυχία της μεταμόσχευσης κυτταρικών συσσωματωμάτων που προέρχονται από όγκους μπορεί επίσης να εξαρτάται εν μέρει από την συμβολή του βιολογικώς δραστικών παραγόντων που παράγονται από τα μη κακοήθη κύτταρα στα συσσωματώματα των κυττάρων που παράγουν παράγοντες ανάπτυξης όγκου και διεγερτικά σε αγγειογένεση. μάζες όγκου πιο συχνά συμβαίνει για πρώτη φορά στα κρανιακά περιοχές της περιτοναϊκής κοιλότητας κοντά και μέσα στο επίπλουν. Η θέση των οζιδίων του όγκου καθώς και η αυξημένη ανάπτυξη των κυτταρικών συσσωματωμάτων και αργή εξέλιξη των όγκων σε άλλα όργανα μπορεί να προκύψει από την αρχική προσκόλληση των κυττάρων του όγκου συσσωματωμάτων σε άκρως vascularized περιοχές εντός του επίπλουν ονομάζεται γαλακτώδεις κηλίδες. Αυτές οι διακριτές περιοχές αναγνωρίστηκαν για πρώτη φορά από Ranvier [33] και έχουν αποδειχθεί ότι είναι περιοχές όπου οι όγκοι αποδίδουν κατά προτίμηση και πολλαπλασιάζονται μετά την ε.π. ένεση πολλών διαφορετικών κυτταρικών γραμμών ποντικού όγκου και μια ανθρώπινη κυτταρική γραμμή όγκου των ωοθηκών σε ποντίκια [34], [35].