Αφηρημένο

Ιστορικό

Πάνω από 100.000 χημικές ουσίες είναι σε χρήση, αλλά δεν έχουν ελεγχθεί για την ασφάλειά τους. Για να ξεπεραστούν οι περιορισμοί στη βιολογική δοκιμασία του καρκίνου διερευνηθούν διάφορες εναλλακτικές στρατηγικές δοκιμών. Η ανικανότητα να παρακολουθήσει με μη επεμβατικό τρόπο εμφάνιση και την εξέλιξη του ορίων της νόσου, εντούτοις, η τιμή του ρεύματος στρατηγικές δοκιμών. Εδώ, αναφέρουμε την εφαρμογή του

in vivo

απεικόνισης σε ένα διαγονιδιακό μοντέλο ποντικού c-Myc καρκίνο του ήπατος για την ανάπτυξη μιας βραχυπρόθεσμης βιοπροσδιορισμό καρκίνου.

Μεθοδολογία /Principal Εκτίμηση

μCT και

18F-FDG μPET χρησιμοποιήθηκαν για την ανίχνευση και τον ποσοτικό προσδιορισμό βλαβών όγκου μετά από αγωγή με το γενοτοξικό καρκινογόνο NDEA, του όγκου παράγοντα προαγωγής ΒΗΤ ή το παρακεταμόλη ηπατοτοξίνη. Η ανάπτυξη του όγκου ερευνήθηκε μεταξύ των ηλικιών 4 έως 8,5 μήνες και αυξημένης αντίθεσης απεικόνιση μCT ανιχνεύεται ηπατικών βλαβών καθώς και μεταστατική εξάπλωση με υψηλή ευαισθησία και ακρίβεια όπως επιβεβαιώθηκε από ιστοπαθολογία. Σημαντικές διαφορές στην έναρξη της ανάπτυξης του όγκου, του φορτίου του όγκου και του μεταβολισμού της γλυκόζης παρατηρήθηκαν όταν η ομάδα θεραπείας NDEA συγκρίθηκε με οποιαδήποτε από τις άλλες ομάδες θεραπείας. θεραπεία NDEA του c-myc διαγονιδιακών ποντικών επιταχύνθηκε σημαντικά την ανάπτυξη του όγκου και προκάλεσαν μεταστατική εξάπλωση του HCC στο πνεύμονα, αλλά αυτή η θεραπεία προκάλεσε επίσης αύξηση πρωτοπαθή καρκίνο του πνεύμονα. Σε αντίθεση, BHT και η παρακεταμόλη δεν προωθούν ηπατοκαρκινογένεσης.

Συμπεράσματα /Σημασία

Η παρούσα μελέτη αποδεικνύει την ακρίβεια των

in vivo

απεικόνισης για τον προσδιορισμό της ανάπτυξης του όγκου, του φορτίου του όγκου, αριθμό βλάβης και μεταστατική εξάπλωση. Κατά συνέπεια, η εφαρμογή του

in vivo

τεχνικές απεικόνισης για να διαγονιδιακά μοντέλα ζώων μπορεί ενδεχομένως να επιτρέψει βραχυπρόθεσμες βιολογικές δοκιμασίες καρκίνο να βελτιώσει σημαντικά τον εντοπισμό των κινδύνων και την παρακολούθηση εξετάσεις των διαφόρων οργάνων από μη επεμβατικές μεθόδους.

Παράθεση: Hueper Κ, Elalfy Μ, Laenger F, Halter R, Rodt Τ, Galanski M, et al. (2012) PET /CT απεικόνισης του c-myc διαγονιδιακών ποντικών Προσδιορίζει το Γονοτοξική Ν-νιτροζο-Diethylamine ως καρκινογόνο σε Short-Term Καρκίνος Βιοδοκιμασία. PLoS ONE 7 (2): e30432. doi: 10.1371 /journal.pone.0030432

Εκδότης: Martin W. Brechbiel, Εθνικό Ινστιτούτο Υγείας, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 17 του Ιούλη 2011? Αποδεκτές: 20 Δεκέμβρη 2011? Δημοσιεύθηκε: 2 Φεβρουαρίου 2012

Copyright: © 2012 Hueper et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Μέρη το έργο χρηματοδοτήθηκαν από το Υπουργείο Επιστήμης και Πολιτισμού, Κάτω Σαξονία, Γερμανία? Αριθμός επιχορήγησης: 25A.5-76251-99-3 /00 Juergen Borlak, ένα PHD-υποτροφία του Αιγυπτιακού Υπουργείου Ανώτατης Εκπαίδευσης στον Μαχμούντ Elalfy, μια επιχορήγηση της έρευνας της GE Healthcare που δόθηκε στο Fraunhofer Institute of Toxicology and Experimental Medicine, Ανόβερο , η Γερμανία και το γερμανικό Ίδρυμα Ερευνών (DFG) για να καλύψει τα έξοδα δημοσίευσης. Αξίζει να σημειωθεί ότι, οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

το ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC) συχνά παρατηρείται σε βιολογικές δοκιμασίες του καρκίνου, ως αποτέλεσμα της έκθεσης ζωής είτε πειραματικά φάρμακα ή ένα ευρύ φάσμα χημικών ουσιών. Συγκεκριμένα, καρκινογόνες ουσίες μπορούν να διακριθούν από τον τρόπο δράσης τους ορισμένες από τις οποίες ασκούν δραστηριότητα είτε μέσω βλάβης του DNA και έτσι είναι όπως ορίζονται γονιδιοτοξικά καρκινογόνα όπως Ν-νιτροζοδιαιθυλαμίνη (NDEA), ενώ άλλα δεν βλάπτουν το DNA, αλλά προκαλούν διαταραχές στη βιολογική διαδικασία που τελικά οδηγεί σε ανεξέλεγκτη ανάπτυξη και ονομάζονται μη γονοτοξικές καρκινογόνες ουσίες. Αυτή η τελευταία ομάδα των καρκινογόνων ουσιών είναι εγγενώς πιο δύσκολο να προβλεφθεί. Επιπλέον, τα φάρμακα και τις χημικές ουσίες μπορεί να μην είναι από μόνες τους ογκογόνο αλλά προωθούν την ανάπτυξη του όγκου.

Επιπλέον, ενώ η διαδικασία της αξιολόγησης της ασφάλειας των χημικών προϊόντων είναι διεθνώς εναρμονισμένα, παραμένει δαπανηρή και χρονοβόρα. Για να μειωθεί ο χρόνος που απαιτείται για την αξιολόγηση της κίνδυνο καρκινογένεσης των φαρμάκων και των χημικών ουσιών, έχουν νέα διαγονιδιακά μοντέλα ζώων έχουν αναπτυχθεί και βιολογικά ανάγνωσης άουτ από τέτοια μοντέλα σε σύγκριση με την καθιερωμένη βιοπροσδιορισμό καρκίνο. Ωστόσο, οι κοινές βιολογικές δοκιμασίες καρκίνου απαιτούν μια περίοδο παρατήρησης των 2 ετών και χρησιμοποιούν ένα μεγάλο αριθμό ζώων που στη συνέχεια υποβάλλονται σε ιστοπαθολογική εξέταση [1].

Για να ξεπεραστούν οι περιορισμοί στη βιολογική δοκιμασία του καρκίνου είναι πολλές εναλλακτικές στρατηγικές δοκιμών είναι διερευνηθούν, είτε γενετικώς τροποποιημένα ζώα,

in vitro

δοκιμασίες με βάση κύτταρα ή ηλεκτρονικά μοντέλα [2] – [7]. Σε αυτό το πλαίσιο τα γενετικώς τροποποιημένα πειραματόζωα μπορεί να αποδειχθεί πολύτιμη για την έγκαιρη ανίχνευση των καρκινογόνων ουσιών στο ήπαρ και έτσι μπορεί να επιτρέψει βραχυχρόνιες μελέτες καρκινογένεσης. Μέχρι στιγμής, αρκετά μοντέλα knock-out, καθώς και διαγονιδιακά μοντέλα ποντικών του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος έχουν αναφερθεί [8]. Για παράδειγμα, η απόκριση της γονιδιοτοξικής καρκινογόνου NDEA αξιολογήθηκε σε μία ρ53 ανεπάρκεια [9], καθώς και στο διαγονιδιακό μοντέλο rasH2 [10] – [12]. Δυστυχώς, και τα δύο μοντέλα παρέλειψε να προσδιορίσει NDEA ως ήπατος καρκινογόνο βραχυπρόθεσμων βιοπροσδιορισμών καρκίνο καθιστώντας αυτή τη στρατηγική λιγότερο ισχυρή για την ανίχνευση του οργάνου συγκεκριμένες καρκινογόνες ουσίες με αυτές τις δύο γενετικά μοντέλα.

Επιπλέον, οι τυποποιημένες δοκιμασίες καρκινογένεσης σε τρωκτικά είναι σε θέση να παρακολουθεί με μη επεμβατικό έναρξη και εξέλιξη της νόσου. Ως εκ τούτου, οι τεχνικές απεικόνισης, όπως μικρο υπολογιστικής τομογραφίας (μCT) και τομογραφία εκπομπής ποζιτρονίων micro (μPET) μπορεί να γίνει μέθοδος επιλογής σε προκλινικές μελέτες για την ανίχνευση

in vivo

καρκινικών βλαβών και για την ποσοτικοποίηση του φορτίου του όγκου.

In vivo

απεικόνισης θα συμβάλει έτσι στην βελτίωση των βιολογικές δοκιμασίες του καρκίνου και να προσφέρει πρόσθετες πληροφορίες, όπως μια αναγνώριση της μεταστατικής εξάπλωσης και η ανάπτυξη δευτερογενών όγκων σε εύθετο χρόνο [13].

Πράγματι, η πρόσφατη πρόοδος σε μικρές τεχνολογίες απεικόνισης ζώο μας ενθάρρυνε να εξετάσει τη χρησιμότητα του μCT και μPET για την ανίχνευση καρκινικών βλαβών σε ένα διαγονιδιακό μοντέλο ποντικού καρκίνου του ήπατος. Με τέτοιες τεχνολογίες γενικής εφαρμογής μCT προσφέρει ένα ψήφισμα των ανατομικών δομών των περίπου 50 μm, παρέχοντας έτσι σημαντικές μορφολογικές πληροφορίες. Αυτό απαιτεί, ωστόσο, η χρήση ενός συγκεκριμένου παράγοντα αντίθεσης όργανο για να επιτρέψει την απεικόνιση της μορφολογίας παρεγχυματώδη. Συγκεκριμένα, το μοντέλο διαγονιδιακού ποντικού c-Myc αναπτύσσει αποτελεσματικά τον καρκίνο του ήπατος σε ένα σύντομο χρονικό διάστημα. Σε αυτό το γενετικό μοντέλο, c-Myc στοχεύεται στο ήπαρ με τη χρήση του υποκινητή α1-αντιτρυψίνη οποία αποκλειστικά ενεργοποιείται στο ήπαρ. Αυτό το μοντέλο αρχικά αναπτύχθηκε από Dalemans et al. [14], αλλά δεν έχει διερευνηθεί για τη χρησιμότητά της σε βραχυπρόθεσμες βιολογικές δοκιμασίες καρκίνου, καθώς ακόμα. Αξίζει να σημειωθεί ότι οι μελέτες ανθρώπινης μοριακής παθολογίας προσδιορίζονται c-Myc ως υπερκινητικά και υπερεκφράζεται στην πλειονότητα των ανθρώπινου ηπατοκυτταρικού καρκινώματος [15] Ως εκ τούτου, παρέχοντας ένα ορθολογικό για την αξιολόγηση αυτού του μοντέλου της νόσου.

Ενώ μερικές αναφορές περιγράφουν την εφαρμογή του ανατομική και μεταβολικές απεικόνισης των πρωτογενών κακοήθειες του ήπατος σε τρωκτικά [16] – [19], ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν, πρώτον, να αναπτύξουν στρατηγικές και να καθορίσει τις παραμέτρους για την ανίχνευση και την ποσοτικοποίηση των ηπατικών βλαβών από

in vivo

αυξημένης αντίθεσης μCT και

18F-FDG μPET μεταβολική απεικόνιση της πρόσληψης γλυκόζης και, δεύτερον, για να αξιολογηθεί η ακρίβεια των μεθόδων αυτών, σε σύγκριση με ιστοπαθολογία και τρίτον, για να προσδιοριστεί η χρησιμότητα της διαγονιδιακό μοντέλο ποντικού c-Myc στην πρόβλεψη με ακρίβεια η ήπατος καρκινογόνο NDEA στη βραχυπρόθεσμη βιολογικής δοκιμασίας και κατά συνέπεια να αξιολογηθεί κατά πόσον ένας συνδυασμός

in vivo

απεικονιστικές μεθόδους και τη χρήση της γενετικής μοντέλα ποντικών μπορεί να βοηθήσει στην ανάπτυξη των βραχυπρόθεσμων βιοπροσδιορισμών καρκίνου για τον έγκαιρο εντοπισμό των επικίνδυνων φαρμάκων και χημικές ουσίες.

διαγονιδιακό μοντέλο Υλικά και Μέθοδοι

όγκου

Όλες οι εργασίες των ζώων ακολούθησε αυστηρά την Δημόσια Πολιτική Υπηρεσία Υγείας σχετικά με την ανθρώπινη φροντίδα και τη χρήση των πειραματόζωων. Η άδεια για τη διεξαγωγή της μελέτης λήφθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας καλής μεταχείρισης των ζώων της πόλης του Ανόβερο, Γερμανία (Tierversuchsvorhaben 33.9-42502-04-08 /1619).

c-Myc διαγονιδιακά ποντίκια ήταν το είδος του δώρου Dalemans et al. [14]. Τα ζώα διατηρήθηκαν ως ομοζυγώτες στο παρασκήνιο C57 /BL6 και αυτό φόντο χρησιμοποιείται ευρέως σε διαγονιδιακά μοντέλα της νόσου, όπως η rasH2 και ρ53 ανεπάρκεια μοντέλο. Αξίζει να σημειωθεί ότι το διαγονίδιο (βλέπε σχήμα S1) αποτελείται από το ανοιχτό πλαίσιο ανάγνωσης c-Myc και ρυθμιστικές αλληλουχίες του υποκινητή α1-αντιτρυψίνη για να επιτρέψει συκώτι συγκεκριμένο γονίδιο έκφραση του c-myc. Αυτό το μοντέλο γενετική ασθένεια έχει μια συχνότητα εμφάνισης του καρκίνου του ήπατος 100%

Το διαγονίδιο ανιχνεύθηκε με PCR χρησιμοποιώντας τον πρόσθιο εκκινητή:. 5′-CACTGCGAGGGGTTCTGGAGAGGC-3 ‘και τον ανάστροφο εκκινητή: 5′-ATCGTCGTGGCTGTCTGCTGG-3’ . Χρησιμοποιήθηκαν οι ακόλουθες συνθήκες δοκιμασίας PCR:. 15 λεπτά, 95 ° C, 1 λεπτό 60 ° C, 1 λεπτό 70 ° C, 1 λεπτό 95 ° C, 31 κύκλοι

Συνολικά 120 c-Myc διαγονιδιακών ποντικών ήταν εξετάζεται από το

in vivo

απεικόνιση ή /και ιστοπαθολογική εξέταση, ενώ τα μη διαγονιδιακά έλεγχοι μελετήθηκαν μόνο ιστοπαθολογική, καθώς αυτά τα ζώα δεν έχουν όγκους. Τα ποντίκια κρατήθηκαν ως ομάδες ζώων με 1 έως 4 ποντίκια ανά κλουβί σε πριονίδι σε έναν κύκλο φωτός-σκότους 12 ωρών, και 50% σχετική υγρασία και θερμοκρασία περιβάλλοντος από 22 ° C. Τα ζώα έλαβαν τυποποιημένη τροφή και πόσιμο νερό κατά βούληση (Zucht, ssniff Μ /, 10 mm, πλήρης διατροφή για ποντίκια, ssniff Προδιαγραφές GmbH, DE-59494, www.ssniff.de).

Σχεδιασμός της μελέτης και μεταχείριση των ζώων με NDEA, βουτυλιωμένο υδροξυτολουόλιο (ΒΗΤ) και παρακεταμόλης

Τα ζώα διαιρέθηκαν σε 7 ομάδες των 24 ζώων εκάστη και αποτελούνταν από n = 12 άρρενες και n = 12 θηλυκά. Θεραπεία των διαγονιδιακών ποντικών με ενδοπεριτοναϊκή ένεση NDEA, ΒΗΤ ή παρακεταμόλη (Sigma Aldrich, Γερμανία με καθαρότητα & gt? 99%), ξεκίνησε σε ηλικία 2 μηνών. Το διαγονιδιακό και τα μη διαγονιδιακά ζώα ελέγχου υποβλήθηκαν επίσης σε αγωγή με μόνο το όχημα, δηλ αραβοσιτέλαιο ή φυσιολογικό ορό (Sigma Aldrich, Germany). ποντίκια NDEA υπέστησαν αγωγή μία φορά την εβδομάδα με ένεση 75 μg /g NDEA σε αλατόνερο για μία περίοδο 6 εβδομάδες, ενώ τα ζώα που έλαβαν 300 μg /g ΒΗΤ σε αραβοσιτέλαιο υποβλήθηκαν σε θεραπεία μία φορά την εβδομάδα για 8 εβδομάδες. Επιπλέον, 100 μg /g παρακεταμόλης σε αλατόνερο χρησίμευσε ως μη καρκινογόνες ηπατοτοξίνη, και αυτό το φάρμακο χορηγήθηκε μία φορά την ημέρα για 5 ημέρες την εβδομάδα για μια περίοδο 8 εβδομάδων (βλέπε Πίνακα 1 για το δοσολογικό σχήμα).

Όπως C57BL /6 ποντικοί είναι ανθεκτικοί σε ηπατοκαρκινογένεσης επάγεται από NDEA [9] μία ομάδα θεραπείας μη διαγονιδιακά NDEA και ΒΗΤ δεν είχε συμπεριληφθεί στο σχεδιασμό της μελέτης είναι σημαντικό ενδιαφέρον ότι μια παρόμοια έλλειψη ευαισθησίας αναφέρθηκε για p53 ανεπάρκεια και για rasH2 /CB6F1 διαγονιδιακά ποντίκια που εκτράφηκαν στην ίδια C57BL /6 υπόβαθρο [11]. Ομοίως, εδείχθη προηγουμένως ότι ΒΗΤ ενισχύει το σχηματισμό όγκου μόνο αν χορηγηθεί μετά την έκθεση στο ουρεθάνη γονιδιοτοξική παράγοντα, αλλά δεν έχει καμία επίδραση επί του ενός [20] ή είναι ακόμη προστασίας, εάν δίνεται πριν από ένα καρκινογόνο [21], [22]. Μια σύνοψη του προγράμματος θεραπείας δίνεται στον Πίνακα 1.

Δόση επιλογή

Με βάση προηγουμένως δημοσιευμένα δεδομένα, όπου ερευνήθηκαν διαφορετικές δόσεις NDEA (εύρος δόσης 75 έως 200 μg /g) για να σχηματισμό όγκου αιτία σε μη διαγονιδιακά τρωκτικά [23], [24], [25], [26], μία δόση 75 μg /g σωματικού βάρους επιλέχθηκε και χορηγείται μία φορά εβδομαδιαίως για 6 εβδομάδες με ενδοπεριτοναϊκή χορήγηση. Στην περίπτωση του ΒΗΤ χορηγήθηκε μία δόση των 300 μg /g σωματικού βάρους. Αυτή η δόση έχει αναφερθεί ότι προκαλεί επαγωγή όγκου στο συκώτι [20]. Τέλος, η παρακεταμόλη χρησιμοποιήθηκε ως μη καρκινογόνες ηπατοτοξίνη και μία δόση των 100 μg /g σωματικού βάρους δόθηκε ε.π. μία φορά την ημέρα για 5 ημέρες την εβδομάδα για μια περίοδο 8 εβδομάδων

In vivo απεικόνιση των διαγονιδιακών ζώων από μCT και μPET

Σε τέσσερα διαφορετικά χρονικά σημεία – δηλαδή στην ηλικία των 4, 5.5, 7 και 8,5 μήνες –

in vivo

μCT και μPET απεικόνισης απασχολούνταν? ζώα θανατώθηκαν στη συνέχεια για ιστοπαθολογική εξέταση.

Όλες οι διαδικασίες απεικόνισης πραγματοποιήθηκαν υπό αναισθησία εισπνοής με isoflurane (Isoba κτηνίατρο., Essex Pharma, Γερμανία) σε συγκέντρωση 4% για την επαγωγή της αναισθησίας και 1-2% για τη συντήρηση . Τα ποντίκια τοποθετήθηκαν σε πρηνή θέση σε ελεγχόμενη θερμοκρασία κλίνης στους 39 ° C (T /Pump, Gaymar, Orchard Park, NY, USA), που επιτρέπει αλλαγές μεταξύ απεικονιστικές χωρίς επανατοποθέτηση και ισοφλουράνιο δόθηκαν μέσω ενός κώνου μύτης (Σύνοδος Κορυφής Αναισθησία Solutions, Bend , OR, USA). Η αναπνοή των ζώων ήταν αυθόρμητη, και ο αναπνευστικός παρακολουθήθηκε συνεχώς χρησιμοποιώντας ένα μικρό μετατροπέα πίεσης (Biovet, απεικόνιση M2M, Newark, NJ, USA). Η αναπνοή διατηρήθηκε με ταχύτητα μεταξύ 60 και 100 ανά λεπτό. Μετά την απόκτηση δεδομένων εικόνας ο χρόνος ανάρρωσης των ζώων από την αναισθησία ήταν συνήθως λιγότερο από πέντε λεπτά. Συνολικά οι διαδικασίες ήταν καλά ανεκτές.

Συγκεκριμένα, διαδοχική μCT και

18F-FDG απεικόνισης μPET διεξήχθησαν με ένα σύνολο 60 ζώων, όπως φαίνεται στον Πίνακα 1. Οι ποντικοί απεικονίζονται στην ηλικία των 4 ( 1ο θυσία), 5.5 (2η θυσία), 7 (3η θυσία) και 8,5 μήνες (4η θυσία). Τα διαγονιδιακά ζώα ελέγχου εξετάστηκαν στην ηλικία των 8,5 μηνών και μόνον (4η θυσία), αν και κάποια διερευνητική απεικόνισης αυξημένης αντίθεσης εκτελέστηκε σε ηλικία 2, 5 και 7 μηνών. Όλα τα ζώα θυσιάστηκαν 2 ημέρες μετά την απεικόνιση ΡΕΤ. Αυτή τη στιγμή το ραδιενεργό ιχνηθέτη μειώθηκε κάτω από το επίπεδο ανίχνευσης. απεικονιστικά ευρήματα επιβεβαιώθηκαν από την τυπική ιστοπαθολογία όπως περιγράφεται κατωτέρω.

Αντίθεση ενισχυμένη μCT απεικόνισης

Όλα τα ζώα υποβλήθηκαν σε νηστεία πριν την απεικόνιση για περίπου 6 ώρες. Τρεις ώρες πριν από την αξονική τομογραφία αναισθητοποιούνται ποντικούς δόθηκε ενδοφλέβια ένεση ενός παράγοντα αντίθεσης ιωδιωμένου ήπατος-ειδική (DHOG, FENESTRA LC, ART Inc., Saint-Laurent, Canada) σε περίπου όγκο 200-300 μΙ (10 μΙ /ζ σωματικού βάρους) στην ουραία φλέβα. Η απόκτηση δεδομένων εικόνας πραγματοποιείται όπως συνιστάται από τον κατασκευαστή και προηγουμένως δημοσιευμένα πρωτόκολλα [18], [19].

Η σάρωση μCT έγινε με υψηλής ανάλυσης μικρό ζώο υπολογίζεται σαρωτή τομογραφία (Explore Locus, η GE υγειονομική περίθαλψη, Chalfont St. Giles, Ηνωμένο Βασίλειο). Οι παράμετροι σάρωσης ορίστηκαν ως εξής: Τάση σωλήνα 80 kVp, ρεύμα σωλήνα 450 μΑ, αριθμός απόκτηση 360, τον αριθμό των απόψεων 720, χρόνος έκθεσης των 100 ms, μία μέση ανά πλαίσιο, αξονικό τομέα-of-view 33 χιλιοστά. Σαρώνει καταγράφηκαν χωρίς αναπνευστική περίφραξη. Συνολική διάρκεια σάρωσης ήταν περίπου 12 λεπτά.

Τα δεδομένα εικόνας ανακατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας έναν αλγόριθμο κώνου πορείας σε ένα σύμπλεγμα linux 8-κόμβο. Η προκύπτουσα μέγεθος voxel του ισοτροπικό σύνολο δεδομένων ήταν 45 μm. Αυθαίρετες τιμές εξασθένησης μετατράπηκαν σε κλίμακα Hounsfield χρησιμοποιώντας ένα φάντασμα βαθμονόμηση με νερό, αέρα και των οστών ένθετα.

μPET απεικόνισης

Αναισθητοποιημένοι ποντικοί έλαβαν μια ενδοπεριτοναϊκή ένεση (ip) 10 MBq (

18F) -2-φθορο-2-δεοξυγλυκόζης σε συνολικό όγκο 50-100 μΙ άσηπτο ισοτονικό αλατούχο διάλυμα τροφοδοτείται από το Τμήμα Πυρηνικής Ιατρικής, Hannover Medical School, Γερμανία. Τα ζώα υποβλήθηκαν σε διαδοχική αξονική και απεικόνισης ΡΕΤ που κατέστησε αναγκαία πολλαπλές ενέσεις στην φλέβα ουράς για πιθανή αιτία αγγειακών βλαβών και εμβολισμός στο σημείο της ένεσης. Όπως αξονικές τομογραφίες απαιτείται ενδοφλέβια χορήγηση FENESTRA (βλέπε παραπάνω)

18F-FDG δόθηκε από ε.π. ένεση. Αυτό μπορεί να καθυστερήσει πρότυπο απόκτηση της FDG, ωστόσο, δεν επηρέασε τη συνολική ερμηνεία των δεδομένων με πρόσληψη γλυκόζης είναι ανάλογη με την ανάπτυξη του όγκου, όπως αποδεικνύεται στην παρούσα μελέτη. Ως εκ τούτου, μετά αποκτήσεις εικόνα CT

18F-FDG χορηγήθηκε σε ποντικούς με ε.π. ένεση. Τα ζώα παρέμειναν υπό αναισθησία και μετά από περίπου 35 λεπτά μεταφέρθηκαν στο ίδιο κρεβάτι /θέση από τον αξονικό τομογράφο στο σαρωτή PET. Στατικές εικόνες αποκτήθηκαν ακριβώς μετά από 45 λεπτά από την ένεση του ιχνηθέτη χρησιμοποιώντας ένα υψηλής ανάλυσης κάμερα PET μικρών ζώων (Explore Vista, GE Healthcare, Chalfont St. Giles, Ηνωμένο Βασίλειο). Ο συνολικός χρόνος απόκτησης ήταν 30 λεπτά για μια ενιαία θέση κρεβάτι. Εικόνες διορθώθηκαν για τυχαία γεγονότα και διασποράς πριν από την ανοικοδόμηση με ένα 3D-εμπρός /επαναληπτικό αλγόριθμο 2D-OSEM. Καμία διόρθωση εξασθένησης χρησιμοποιήθηκε.

Εικόνα ανάλυση

μCT σύνολα δεδομένων έγιναν ορατά και αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας τα πακέτα λογισμικού Microview 2.2 (GE Healthcare, Chalfont St. Δήλες, UK), MeVisLab 2.0 (MeVis Medical Solutions AG, Βρέμη, Γερμανία) και Osirix (v.3.7.1 32-bit, Pixmeo Sarl). Ο συνολικός όγκος του ήπατος υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας την LiveWireMacro μονάδας (MeVisLab 2.0) η οποία χρησιμοποιεί ένα ημι-αυτόματο μέθοδος τμηματοποίησης περίγραμμα που βασίζεται. Εστιακών ηπατικών αλλοιώσεων μετρήθηκαν και ποσοτικά με 2D-μέτρηση της μεγαλύτερης διαμέτρου. Η διάμετρος (δ) των βλαβών χρησιμοποιήθηκε για να εκτιμάται ο όγκος του όγκου από τον ακόλουθο τύπο: όγκος του όγκου (V) = 1/6-χ π χ d

3. Προστέθηκαν Οι όγκοι όλων των βλαβών του ήπατος για να προσδιοριστεί ο συνολικός όγκος του όγκου. Το ποσοστό του όγκου του ήπατος υπολογίστηκε ως η αναλογία του συνολικού όγκου (ml) του όγκου και του συνολικού όγκου του ήπατος (ml).

Άκαμπτα καταγραφής των ΡΕΤ και CT σύνολα δεδομένων βασίστηκε σε ανατομικά ορόσημα και χρησιμοποιείται για να παράγει λιωμένο σύνολα δεδομένων. Περιοχές ενδιαφέροντος (ROI) ήταν το χέρι που καθορίζονται για εστιακών ηπατικών βλαβών με διάμετρο άνω των 5 mm, όπως ανιχνεύεται σε μCT και

18F-FDG μPET απεικόνισης. Το υπόβαθρο σήματος (μη-όγκου) προσδιορίστηκε με τοποθέτηση ενός ROI στον όγκο χωρίς ηπατικού παρεγχύματος και του μέγιστου αριθμού των ανά όγκο προσδιορίστηκε για κάθε ROI για την εκτίμηση των αναλογιών όγκου-προς-μη-όγκου.

ιστοπαθολογία

Δύο ημέρες μετά την τελευταία ποντίκια υποβλήθηκαν σε ευθανασία απεικόνισης και του ήπατος και των πνευμόνων απομακρύνθηκαν για ιστοπαθολογία. Το σύνολο πνεύμονες και το ήπαρ βυθίστηκαν σε ρυθμιστικό διάλυμα 4% φορμαλδεΰδης και εγκλείστηκαν σε παραφίνη με πρότυπες εργαστηριακές διαδικασίες. Στη συνέχεια, 4-5 μm τομές των μπλοκ που απέχουν κατά ένα χρονικό διάστημα 500 μm παρασκευάσθηκαν από τον κεντρικό πυρήνα του ενσωματωμένου ιστού και χρωματίζονται με Η &? Ε. Αυτές οι διαφάνειες εξετάστηκαν χρησιμοποιώντας ένα μικροσκόπιο Olympus BX51 σε 40 × αρχική μεγέθυνση. 4 διαφορετικά μορφολογικά ευρήματα καταγράφηκαν: 1) την τακτική ηπατικό παρέγχυμα, όπως ορίζεται από το μέγεθος των κυττάρων και τη διατήρηση της αρχιτεκτονικής, 2) διάχυτη τοξική τραυματισμό του ηπατικού παρεγχύματος, όπως ορίζεται από το αερόστατο, εκφυλισμό, αλλά διατήρηση της αρχιτεκτονικής, 3) οζίδια δυσπλαστικών με οζώδη αδρανών υλικών της διευρυμένης ηπατικών κυττάρων με χαμηλής ποιότητας κυτταρική δυσπλασία, 4) ηπατοκυτταρικού καρκινώματος, όπως ορίζεται από την κυτταρική και αρχιτεκτονική ατυπία με πολυεπίπεδο δοκιδώδους ή pseudoglands. Τύπος, ο αριθμός και το μέγεθος καταγράφηκαν για όλες τις βλάβες και σε σύγκριση με τα αποτελέσματα της ακτινολογικής απεικόνισης. Επιπλέον, το φορτίο όγκου σκόραρε ημιποσοτικά χρησιμοποιώντας αυξήσεις 5%.

Η στατιστική ανάλυση

Το

in vivo

απεικόνιση του όγκου του ήπατος και το

ex vivo

μετριέται βάρος του ήπατος καταγράφηκαν και ο όγκος του ήπατος και ο όγκος του όγκου υπολογίστηκαν και ορίζεται ως το ποσοστό του όγκου. Όλες οι τιμές δίνονται ως μέση τιμή ± SEM. Η στατιστική σημαντικότητα προσδιορίστηκε με τη δοκιμή συσχέτισης Pearson (r είναι ο συντελεστής συσχέτισης) και απεικονιστικά ευρήματα επικυρώθηκαν με ιστοπαθολογική όπως περιγράφεται παραπάνω

Το όγκου-προς-μη-όγκο αναλογίες που ορίζονται για τις μικρές (& lt?. 5 mm), μέσης (5-10 mm) και μεγάλες αλλοιώσεις (& gt? 10 mm) και στατιστική σημαντικές διαφορές προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας την μονόδρομη ANOVA και το Bonferroni μετα-τεστ

Σε διαφορετικά χρονικά σημεία και για. όλες οι ομάδες μελέτης τα μέσα και οι τυπικές αποκλίσεις του ποσοστού όγκου, η πολλαπλότητα των όγκων και η αναλογία όγκου-προς-μη-όγκο συγκρίθηκαν. Η μονόδρομη ANOVA και το μετά τη δοκιμή Bonferroni χρησιμοποιήθηκαν για να αξιολογηθεί η στατιστική σημασία (αποκοπή ρ-τιμή προσδιορίζεται ως 0,05).

Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν και κατέστησαν ορατά χρησιμοποιώντας SPSS Statistics 17.0 και GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software , Inc.).

Αποτελέσματα

Αντίθεση με ενισχυμένη ήπατος μορφολογία και τη γλυκόζη μεταβολική απεικόνιση

Κατά την έναρξη της μελέτης κανένα από τα διαγονιδιακά ζώα είχαν όγκους στο ήπαρ ή προκαρκινικές αλλοιώσεις ενώ στο τέλος της μελέτης συνολικά 244 ηπατικών αλλοιώσεων ανιχνεύθηκαν ότι ποικίλη σε μέγεθος μεταξύ 0,9 mm και 25,0 mm. Αξίζει να σημειωθεί ότι, η ενδοφλέβια ένεση του ιωδιωμένου παράγοντα αντίθεσης ήπατος-ειδική DHOG ορίζεται αλλοιώσεις όγκου όπως υπόπυκνες σε σύγκριση με τον κανονικό περιβάλλοντα ηπατικό παρέγχυμα (Σχήμα 1). Βλάβες μεγέθους της & gt? 1 χιλιοστό θα μπορούσε να ταυτιστεί με βεβαιότητα με μCT αλλά όχι με απεικόνιση FDG μPET για βλάβες του & lt? 5 mm. Σε ζώα με υψηλό φορτίο όγκου μεμονωμένες βλάβες δεν μπορούσαν πάντοτε να επιλυθεί λόγω επιμέρους όγκους που είχαν συγχωνευθεί μαζί (όγκοι σύγκρουση).

Η αξονική φέτες του CT (Α) και ένα FDG-ΡΕΤ scan (Β) καθώς και στεφανιαία φέτες ενός αξονική τομογραφία (C) και μακροσκοπική άποψη (D) ενός εκφυτευμένη ήπατος ενός NDEA αντιμετωπίζονται ποντικιού στην ηλικία των 7 μηνών. Σε σύγκριση με τις κανονικές όγκους ηπατικό παρέγχυμα είναι hypodens στο CT ως η πρόσληψη του συγκεκριμένου παράγοντα αντίθεσης ήπαρ μειώνεται. τομογραφία PET αποκαλύπτουν καρκινικές βλάβες από την αυξημένη πρόσληψη ιχνηλάτη λόγω της ενισχυμένης μεταβολισμό της γλυκόζης. Λόγω του προχωρημένου σταδίου όγκους της νόσου του διαφορετικού μεγέθους είχαν συγχωνευθεί μαζί. Κ = νεφρών, L = πνεύμονα, S = σπονδυλική στήλη, Sp = σπλήνα, Τ = όγκου.

Η

Αξιολόγηση της ανάπτυξης και της πολλαπλότητας των καρκινικών βλαβών

Η θεραπεία διαγονιδιακών ποντικών με τη γενοτοξική hepatocarcinogen NDEA που προκαλείται από την ταχεία ανάπτυξη της HCC. Στην ηλικία των 4 μηνών (1ο θυσία) 1 από 6 ζώα είχαν HCC, και η συχνότητα εμφάνισης όγκου ήταν ήδη 100% στην ηλικία των 5,5 μηνών (2ο θυσία). Με αξονική τομογραφία του ήπατος και του όγκου του όγκου προσδιορίστηκε και η προκύπτουσα αναλογία ορίστηκε ως ποσοστό του όγκου (Σχήμα 2Α). Συνολικά, δεν υπήρχε διαφορά στη συχνότητα εμφάνισης όγκου ή του όγκου του όγκου όταν αρσενικό και θηλυκό c-myc διαγονιδιακών ποντικών που έλαβαν θεραπεία με NDEA συγκρίθηκαν (Πίνακας 2).

(Α) Ο όγκος του οργάνου και του όγκου αξιολογήθηκε με CT και από ιστοπαθολογία. Απεικονίζεται είναι ο όγκος του όγκου ποσοστό σε διαφορετικά στάδια μετριέται είτε με ιστοπαθολογική (ανοιχτό γκρι) ή αντίθετα ενισχυμένη αξονική τομογραφία (σκούρο γκρι). Η μέση διάμετρος των βλαβών (Β) και το συνολικό αριθμό των βλαβών (C) δείχνονται. * P & lt? 0,05. ** P & lt?. 0.01

Η

Τα δεδομένα επικυρωθεί από ιστοπαθολογική εξέταση, όπως περιγράφεται παρακάτω. Υπήρξε καλή συμφωνία μεταξύ της ιστοπαθολογία και

in vivo

αποτελέσματα απεικόνισης. Όσον αφορά την ανάπτυξη του όγκου παρατηρήθηκε η μεγαλύτερη διαφορά μεταξύ του 1ου και 2ου θυσία όπου CT-τομογραφίες ορίζεται όγκων του όγκου ποσοστό 2,8% και 58,0%, αντίστοιχα. Στην ηλικία των 8,5 μηνών (4ος θυσία) ο όγκος του όγκου ποσοστό ήταν 69,3%. Η διάμετρος και ο αριθμός των βλαβών προσδιορίστηκαν με αξονική τομογραφία και με ιστοπαθολογική. Με NDEA οι αλλοιώσεις όγκου αυξημένο χρόνο εξαρτώμενο από 2,2 ± 0,3 mm (1ο θυσία) στο 6,5 ± 0,9 mm (Σχήμα 2Β). Ομοίως, πολλαπλότητα του όγκου για NDEA αγωγή ζώα αυξήθηκαν από την πρώτη στη 2η θυσία αλλά στη συνέχεια μειώθηκαν πιθανώς ως αποτέλεσμα της συγχώνευσης όγκων (Σχήμα 2C).

Η ανάπτυξη του όγκου εξαρτώνται από το χρόνο απεικονίζεται επίσης στο Σχήμα 3, όπου CT και η τομογραφία εκπομπής ποζιτρονίων των ζώων NDEA αντιμετωπίζονται αποκτήθηκαν στην ηλικία των 5,5 και 7 μήνες αντίστοιχα. Εδώ ο μεταβολισμός της γλυκόζης στο ήπαρ βλαβών προσδιορίστηκε με in vivo

18F-FDG μPET απεικόνισης.

(A) CT εικόνα δείχνει μια βλάβη ενιαίου όγκου (Α1) σε 5,5 μηνών το ποντίκι χωρίς να αυξηθεί

πρόσληψη 18F-FDG (Α2). Το λιωμένο CT και PET εικόνα απεικονίζεται σε Α3. (Β) Σε ηλικία 7 μηνών αύξησης επεκτατική όγκου (Β1), καθώς και μία αυξημένη πρόσληψη ιχνηλάτη σε ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (Β2) παρατηρείται. Το λιωμένο CT και PET εικόνα απεικονίζεται στο Β3. G = χοληδόχου κύστης, Κ = νεφρά, L = συκώτι, S = σπονδυλική στήλη, St = στομάχι, Τ = όγκου.

Η

Για να καταστεί δυνατή η ακριβής ανατομική εντόπιση των εστιακών πρόσληψης

18F-FDG, εγγραφή και σύντηξη των μCT και μPET σύνολα δεδομένων έχουν αποκτηθεί πριν από την ποσοτική ανάλυση της απεικόνισης γλυκόζης (βλέπε Εικόνα 3). Για το σκοπό αυτό, τα ζώα τοποθετήθηκαν σε πρηνή θέση σε θερμοκρασία πολυτροπικότητα ελεγχόμενη κρεβάτι χωρίς επανατοποθέτηση των ζώων, όταν άλλαξαν την απεικόνιση λεπτομερειών. Έτσι, τα ζώα κρατήθηκαν υπό αναισθησία εισπνοής και στην ίδια θέση κρεβάτι μεταξύ CT και PET σάρωση για να επιτρέψει την καταγραφή των σαρώσεων.

Το

18F-FDG-πρόσληψη ήταν κυρίως ομοιογενές μεταξύ των ηπατικών βλαβών. Ορισμένες από τις μεγαλύτερες βλάβες εμφανίζεται ένα ανομοιογενές πρόσληψη

18F-FDG που ήταν ιδιαιτέρως εμφανή στα περιφερειακά τμήματα του όγκου. Ανομοιογενή πρόσληψη ιχνηλάτη συνδέθηκε με κυστική και νεκρωτικές μεταβολές του όγκου που γειτνιάζουν με ζωτικά καρκινικό ιστό όπως αποδεικνύεται από ιστοπαθολογία.

Σε γενικές γραμμές, η αναλογία μέσης όγκου-προς-μη-όγκου ήταν εξαρτάται από το μέγεθος του όγκου (Σχήμα 4). Για βλάβες μεγαλύτερο από 10 mm, η αναλογία όγκου-προς-μη-όγκο ήταν 3,3 ± 0,6 και προσδιορίσθηκε να είναι στατιστικώς σημαντική αύξηση (ρ & lt? 0,05) σε σύγκριση με αλλοιώσεις με διάμετρο από 5 έως 10 mm (1,6 ± 0,2). Για τις μικρότερες βλάβες η αναλογία όγκου-προς-μη-όγκου ήταν 0.98 ± 0.03, γεγονός που υποδηλώνει επομένως καμία αύξηση σε

18F-FDG-πρόσληψης σε σύγκριση με το φυσιολογικό ηπατικό παρέγχυμα.

όγκου προς μη αναλογία όγκου, που καθορίζεται από την απεικόνιση γλυκόζη ΡΕΤ, ήταν σημαντικά αυξημένη σε βλάβες & gt? 10 mm. * P & lt? 0,05. ** Ρ & lt?. 0.01

Η

Σχήμα 5 συνοψίζει PET /CT απεικόνισης και τροπικότητα σύντηξη των εικόνων που λαμβάνονται από διαγονιδιακά ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με είτε αλατούχο (Σχήμα 5Α), ΒΗΤ (Σχήμα 5Β) ή NDEA (Σχήμα 5C ). Σημειώστε, σε 1 από τα 6 ζώα που υπέστησαν αγωγή με BHT ένας όγκος & gt?. Παρατηρήθηκε 10 mm

που απεικονίζονται είναι το ήπαρ μορφολογία όπως προσδιορίζεται με CT (Α1, Β1, C1), το μεταβολισμό της γλυκόζης (Α2 , Β2, C2) και συντήκονται PET και αξονική τομογραφία (Α3, Β3, C3) διαγονιδιακών ζώων αγωγή είτε με φυσιολογικό ορό (Α), με ΒΗΤ (Β) ή με NDEA (C) στην ηλικία των 8,5 μηνών. Σημειώστε, μετά παρατηρήθηκε θεραπεία με NDEA ανάπτυξη επεκτατική όγκου με μεγάλη αύξηση του βάρους του ήπατος και συμπίεση και μετατόπιση των παρακείμενων οργάνων. Εδώ, οι βλάβες έδειξαν αυξημένη πρόσληψη 18F-FDG. Σε αντίθεση, στα αντίστοιχα ζώα ελέγχου έλαβαν θεραπεία με φυσιολογικό ορό δεν παρατηρήθηκαν αλλοιώσεις του ήπατος. Μετά τη θεραπεία με BHT μικρό hypodens βλάβες παρατηρήσει, αλλά το ΡΕΤ δεν δείχνουν αυξημένη πρόσληψη 18F-FDG. Κ = νεφρών, L = συκώτι, S = σπονδυλική στήλη, Sp = σπλήνα, St = στομάχι, Τ = όγκου.

Η

Επιπλέον, η θεραπεία των διαγονιδιακών ζώων με την παρακεταμόλη ηπατοτοξίνη δεν προκάλεσε την ανάπτυξη του όγκου, όπως προσδιορίζεται ιστοπαθολογική (βλέπε παρακάτω).

Επικύρωση των αποτελεσμάτων απεικόνισης ιστοπαθολογική

η ιστοπαθολογική εξέταση αποδεικνύεται φυσιολογικό ήπαρ με πλήρη διατήρηση των λοβών αρχιτεκτονικής, χοληφόρων οδών και αγγείωση παρεγχύματος σε μη διαγονιδιακά ποντίκια. Στην αγωγή όχημα c-Myc διαγονιδιακά ζώα διάχυτη δυσπλασία παρατηρήθηκε (Σχήμα 6Α). Ένας μικρός αριθμός των διαγονιδιακών ζώων που έλαβαν είτε φυσιολογικό ορό (1/24 ζώα) ή αραβοσιτέλαιο (4/24 ζώα), καθώς και τα ζώα που υπέστησαν αγωγή ΒΗΤ (3/24 ζώα) εμφανίζεται ομοιόμορφη ή πολυεστιακή δυσπλαστικών οζιδίων συκώτι αντικατάσταση 10-80 % του ηπατικού παρεγχύματος που κυμαίνονταν σε μέγεθος μεταξύ 1 και 10 mm. Αυτές οι εστίες αποτελούνταν από διευρυμένη ηπατοκυττάρων με ένα διατηρημένο πυρηνική κυτταροπλασματική αναλογία, ομοιόμορφη σε bicellular στρώματα και μια συνολική οζώδη αρχιτεκτονική. Τα διαγονιδιακά ζώα που έλαβαν θεραπεία με παρακεταμόλη ήταν παρόμοιες σε ιστοπαθολογία όπως παρατηρείται με τους μάρτυρες που έλαβαν φορέα (εικόνα δεν φαίνεται). Ένα ζώο κάθε αραβοσιτέλαιο και φυσιολογικό ορό αγωγή διαγονιδιακά ζώα εμφανίζονται μικρές εστίες του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος. Εδώ το μέγεθος των κυττάρων ήταν μικρότερο συγκριτικά με τις εστίες δυσπλαστικές με την αύξηση των πυρηνικών μέγεθος και σημαντική παραμόρφωση της αρχιτεκτονικής αποκαλύπτοντας πολυστρωματικό δοκίδα και περιοχές της κυστικής pseudoglands.

(Α) Διάχυτη ηπατικών κυττάρων δυσπλασία φυσιολογικού ορού (= οχήματος) κατεργάζεται διαγονιδιακά ποντίκια στο (Α1) 50- και (Α2) 200-πλάσια μεγέθυνση. (Β) Μεγάλες δυσπλασία κυττάρων διαφόρων βαθμών σε ΒΗΤ αγωγή ζώα σε (Β1) 50- και (Β2) 200-πλάσια μεγέθυνση. (Γ) Το ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα ενός διαγονιδιακού ποντικού αγωγή με το γονιδιοτοξική καρκινογόνο NDEA σε (C1) 50 και (C2) 200-πλάσια μεγέθυνση.

Η

Ο αριθμός, το μέγεθος και τη βιολογική επιθετικότητα του ήπατος αλλοιώσεις ήταν εντελώς που συνδέονται με την θεραπεία NDEA (Σχήμα 6C). Ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα με πολυεπίπεδο αρχιτεκτονικής δοκιδωτού παρατηρήθηκε ήταν pseudoglandular περιοχές και μερικές φορές κυστική χώρους εντός των όγκων. Από τα 18 ζώα που εξετάστηκαν με ιστοπαθολογική 13 αποκάλυψε ηπατοκυτταρικά καρκινώματα μερικές από τις οποίες (η = 10 ζώα) που εμφανίζονται οζίδια δυσπλαστικών δίπλα στο ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα, καθώς και. Επιπλέον, 3 ζώα εντοπίστηκαν με οζίδια δυσπλαστικών μόνο, ενώ σε 8 περιπτώσεις, το HCC συνοδεύτηκε επίσης από σημαντική πολλαπλασιασμό του χοληδόχου πόρου. Όλα HCC είχε περιοχές της πολυεπίπεδο αρχιτεκτονικής δοκιδωτού, η πλειοψηφία αποκάλυψε επίσης pseudoglandular περιοχές μερικές φορές με μεγάλη κυστική και χώρους πελίωση-όπως. Λόγω της στενής χωρική και χρονική σχέση των οζιδίων δυσπλαστικών και HCC στο συκώτι των διαγονιδιακών ζώων φαινόταν λογικό να καθορίσει οζίδια δυσπλαστικών ως πρόδρομοι και πρώιμες βλάβες του καρκίνου του ήπατος. Εδώ, το μέγεθος των βλαβών μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως μέσο για να διαφοροποιηθούν οι βλάβες του ήπατος οπότε δυσπλαστικών οζιδίων ήταν μικρότερες από 5 mm και HCC ήταν μεγαλύτερα από 10 mm.

Μερικά ζώα που έλαβαν θεραπεία με NDEA εμφανίζεται μετάσταση του πρωτογενούς ήπατος καρκίνος του πνεύμονα σε (Εικόνα 7Β) αλλά η κατεργασία με NDEA επάγεται επίσης πρωτοπαθή καρκίνο του πνεύμονα, όπως αποδεικνύεται από

in vivo απεικόνιση και

ιστοπαθολογία (Σχήμα 7C). Έτσι, μερικά ζώα είχαν επιβαρυνθεί από πρωτογενή και δευτερογενή ανάπτυξη του όγκου σε δύο διαφορετικά όργανα.

(A) κανονικό πνευμονικό παρέγχυμα ενός ζώου ελέγχου θεραπεία με όχημα, όπως φαίνεται από την αξονική τομογραφία (Α1) και ιστοπαθολογική (Α2). CT του NDEA αγωγή ζώα σε ηλικία 8,5 μηνών. Απεικονίζονται οζίδια πνεύμονα διαφορετικού μεγέθους (κόκκινα βέλη). Ιστοπαθολογική εξέταση αποδεικνύεται αυτών των οζιδίων του πνεύμονα, όπως μετάσταση ενός φτωχά διαφοροποιημένα HCC (Β2) και καθώς αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα (C2).

Η

Ακρίβεια

της in vivo

απεικόνισης

Υπήρξε μια πολύ σημαντική συσχέτιση μεταξύ του όγκου του ήπατος, η οποία υπολογίζεται από το ημιαυτόματο τμηματοποίηση της CT-σαρώσεις, και το βάρος του ήπατος, καθορίζεται

ex vivo

(συντελεστής συσχέτισης r = 0,99, p & lt? 0.001). Επιπλέον, ο υπολογιζόμενος όγκος του ήπατος συσχετίζεται με τον εκτιμώμενο όγκο του όγκου (r = 0,94, ρ & lt? 0.001). (Βλέπε σχήμα S2)

Στο Σχήμα S3 συκώτι αναλογία βάρους σώματος διαγονιδιακών ποντικών που έλαβαν θεραπεία με είτε NDEA ή ΒΗΤ να είναι δεδομένος.